白花蛇舌草对人肝癌Bel7402细胞凋亡的影响论文.docVIP

　　白花蛇舌草对人肝癌Bel7402细胞凋亡的影响论文 .freelRNA表达的变化。结果 光镜下观察到白花蛇舌草组肿瘤细胞脱壁,有细胞出芽现象等凋亡形态改变；凋亡指数略低于5-Fu阳性对照组,但与空白对照组比较有显著差异(P 0.01)；细胞抑制率略低于5-Fu阳性对照组,与空白对照组相比有显著差异(P 0.01)；上调p53基因mRNA表达,降低Bcl-xl基因mRNA表达,与空白对照组比较均有显著差异。结论 白花蛇舌草抑制人肝癌Bel7402细胞增长,诱导细胞凋亡,其分子机制可能与激活抑癌基因p53基因、抑制原癌基因Bcl-xl基因表达有关。 【关键词】 白花蛇舌草；人肝癌Bel7402细胞；细胞凋亡；Bcl-xl基因；p53基因 Abstract：Objective To study the inducing apoptosis of Hedyotis diffusa extract (HDE) on human hepatocarcinoma cell line Bel7402 and its molecular mechanism. Methods Human hepatocarcinoma cell line Bel7402 respectively. The apoptosis morphologic changes of human hepatocarcinoma cells icroscope. The apoptosis rate atoxylin stain by light microscope. Inhibition of Bel7402 cell proliferation easured by MTT assay. The expression of oncogene Bcl-xl and anti-oncogene p53 of Bel7402 ceils itochondria could be found through light microscope. The apoptosis rate of HDE group arkably increased pared arkably increase pared or cells apoptosis, the activation of p53 and the suppression of Bcl-xl may contribute to the apoptosis mechanism. Key L水浸泡 60 min,加热沸腾60 min, 120目网筛过滤弃药渣,滤液12 000 r/min离心20 min 2次,取上清液,浓缩至90 mL,0.22 μm滤膜过滤除菌,获1.0 g/mL白花蛇舌草提取液,浓缩成100 mg/mL白花蛇舌草提取物溶液。 2.2 细胞形态学观察 人肝癌Bel7402细胞株常规培养于含10%灭活胎牛血清RPMI-1640培养液中,传代后培养48～72 h的贴壁细胞为对数生长期细胞用于实验。消化、搜集对数生长期的细胞,将细胞密度调整至2×107/mL,吸取100 μL细胞接种于有盖玻片的96孔板,培养箱孵育24 h以让细胞贴壁。吸出培养液,分为空白对照组、5-Fu对照组、100 mg/mL白花蛇舌草组3组,每组6孔。培养箱孵育48 h。直接观察细胞形态变化。经漂洗、固定后进行HE染色,观察细胞形态变化,计数100个细胞。凋亡指数＝凋亡细胞数/计数细胞总数×100%。x 【摘要】 目的 从基因水平研究白花蛇舌草对体外培养的人肝癌Bel7402细胞诱导凋亡的作用及其可能的作用机制。方法 采用人肝癌Bel7402细胞常规体外培养,随机设定空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)阳性对照组、白花蛇舌草组。倒置显微镜直接观察细胞形态变化。HE染色法光镜下观察细胞形态改变,计算凋亡指数。采用MTT法检测白花蛇舌草对癌细胞的生长抑制作用。RT-PCR半定量法检测Bcl-xl、p53基因mRNA表达的变化。结果 光镜下观察到白花蛇舌草组肿瘤细胞脱壁,有细胞出芽现象等凋亡形态改变；凋亡指数略低于5-Fu阳性对照组,但与空白对照组比较有显著差异(P 0.01)；细胞抑制率略低于5-Fu阳性对照组,与空白对照组相比有显著差异(P 0.01)；上调p53基因mRNA表达,降低Bcl-xl基因mRNA表达,与空白对照组比较均有显著差异。结论 白花蛇舌草抑制人肝癌Bel7402细胞增长,诱导细胞凋亡,其分子机制可能与激活抑癌基因p53基因、抑制原癌基因Bcl-xl基因表达有关。 【关键词】 白花蛇舌草；人肝癌Bel7402细胞；细胞凋亡；Bcl-xl基因；p53基因 Effect of Hedyotis Diffusa