第五章 微生物的营养和培养基4.ppt

第四节 培养基 组合培养基的优点： 成分精确、重演性高。 缺点： 价格较贵、配制较烦，且微生物生长比较一般。 组合培养基仅适用于营养、代谢、生理、生化、 遗传、育种、菌种鉴定或生物测定等 对定量要求较高的研究工作中。 3.半组合培养基（semi-defined media） 又称半合成培养基（semi-synthetic media），指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。 例如，培养真菌的马铃薯蔗糖培养基 等。 严格地讲，凡含有未经特殊处理的琼脂的任何组合培养基，因其中含有一些未知的天然成分，故实质上都只能看作是一种半组合培养基。 1.液体培养基（liquid media） 一类呈液体状态的培养基，在实验室和生产实践中用途广泛，尤其适用于大规模的培养微生物。 2.固体培养基（solid media） 广义：一类外观呈固体状态的培养基。 狭义：在液体培养基中加入凝固剂，使之成为固体的培养基。 固体培养基为微生物生长提供一个营养表面，微生物在这表面上可以形成单个菌落。 （1）固化培养基（solidified medium） （2）非可逆性固化培养基 （3）天然固态培养基 （4）滤膜（membrane filter） 根据固体的性质又可把它分为4种类型： 固体培养基在科学研究和生产实践上具有广阔的用途， 例如，可用于菌种的分离、鉴定， 菌落计数，检验杂菌， 选种、育种，菌种保藏， 抗生素等生物活性物质的生物测定， 获取大量真菌孢子， 以及用于微生物固体培养和大规模生产等。 3.半固体培养基（semi-solid media） 例如，“稀琼脂”（sloppy agar），它在小型容器倒置时不会流出，但在剧烈震荡后则呈破散状态。 指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态培养基， 一般可在液体培养基中加入0.5％左右的琼脂制成。 半固体培养基可放入试管中形成“直立柱”，这在微生物学实验中有许多独特的用途， 例如，细菌的动力观察（在半固体直立柱中央进行细菌的穿刺接种，观察细菌的运动能力）， 微生物趋化性的研究， 厌氧菌的培养、分离和计数， 细菌和酵母菌的菌种保藏， 以及噬菌体效价测定（双层平板法）等。 4.脱水培养基（dehydrated culture media） 又称脱水商品培养基（dehydrated commercial media）或预制干燥培养基（pre-fabricated dried culture media）,指含有除水以外的一切成分的商品培养基，使用时只要加入适量水分并加以灭菌即可，是一类既有成分精确又有使用方便等优点的现代化培养基。 （1）固化培养基（solidified medium） 例如，加有1～2％琼脂（agar）或5～12％明胶（gelatin）的液体培养基，可制成遇热可融化、冷却后则呈凝固态的用途最广的固化培养基。 常称“固体培养基”，由液体培养基中加入适量的凝固剂（gelling agent）而成。 凝固剂必须具有的特点： a. 不被微生物液化、分解和利用 b. 在微生物生长的范围内保持固体状态 c. 凝固点的温度对微生物无害 d. 不因消毒灭菌的高温处理而破坏 e. 配制方便、价格低廉 f. 透明度好、粘着力强 常用的凝固剂： 琼脂（agar）、 明胶（gelatin）、 海藻酸钠（alginate）、 脱乙酰吉兰糖胶（Gelrite）、 多聚醇F127（pluronic polyol F127 ）等。 琼脂是最优良的凝固剂，自1880年代开始用于配制微生物培养基以来，至今经久不衰。 除了用凝固剂配制固体培养基外，一些天然的固体营养物质也能制成固体培养基。 例如，马铃薯块、胡萝卜条和米饭等。 3.精心设计 设计、试验新配方 各项因素的比较或反复试验 优选法或 正交试验设计法 工作量很大 4.试验比较 试验的规模一般都遵循 由定性到定量、 由小而大地 逐步扩大的原则。 生态模拟 参阅文献 精心设计 试验比较 设计一种优化的培养基 例如，先在培养皿琼脂平板上测试某微生物的营养要求， 然后作摇瓶培养（shake culture）试验， 再进行台式发酵罐培养试验， 最后才扩大到试验型发酵罐和生产型发酵罐的规模。 二、培养基的种类 培养基——微生物的菜谱 名目繁多、种类各异 （一）按对培养基成分的了解作分类 天然培养基 组合培养基 半组合培养基 （二）按培养基外观的物理状态作分类 液体培养基 固体培养基 半固体培养基 脱水培养基 （三）按培养