兔移植静脉重塑进程中凋亡及增殖的时间特性.pdfVIP

摘要  摘 要 目的： 建立兔自体静脉移植再狭窄模型，采用形态学观察、免疫组化、TUNEL 法、 电镜观察以及 Western Blot 等多种研究手段，研究移植静脉重塑过程中凋亡水平 及增殖的时间特性，以期为预防移植静脉再狭窄提供调控、干预的时间点。 方法： 对  42  只健康纯种新西兰大耳白兔建立兔颈外静脉颈总动脉旁路移植术模 型。将其分为 7 组，分别于术前、术后第 1 天、术后第 3 天、术后第 7 天、术 后第 14天、术后第 28天以及术后第 90天将移植静脉取出，并对其进行狭窄程 度、PCNA 蛋白水平、凋亡及透射电镜等相关检测。 结果： 1、内膜厚度正常静脉组为(4.66μm±0.6μm)；术后第  1 天开始略有下降  (1.47μm±0.3μm)，与正常静脉组比较差异有显著性(P0.05)；至术后第 3 天组之 后持续上升，术后第三天组(3.41μm±0.2μm)，术后第 7天组(18.1μm±2.5μm)，术 后第 14 天组(35.7μm±5.1μm)，术后第 28 天组(65.5μm±5.0μm)，术后第 90 天组  (93.5μm±6.4μm)，均高于正常静脉组，差异有显著性(P0.05)；中膜+外膜厚度 正常静脉组为(6.4μm±0.9μm)；术后持续升高。术后第 1天组(8.5μm±1.1μm)，术 后第 3 天组(15.6μm±1.9μm)，术后第  7 天组(45.6μm±5.0μm)，术后第  14 天组  (62.3μm±2.7μm) ， 术 后 第  28  天 组 (123.9μm±5.6μm) ， 术 后 第  90  天 组  (130.6μm±10.0μm)，均高于正常静脉组，差异有显著性(P0.05)。  2、Western Blot 示：PCNA 目的条带与内参条带灰度百分比在正常静脉组为  40.6%±2.4%；术后第一天组(36.5%±5.1%)低于正常静脉组，差异有显著性  (P0.05)；之后开始上升，术后第三天组(43.6%±4.4%)，高于正常静脉组，差异 有显著性(P0.05)；至术后第 7天组到达最高峰(77.9%±7.1%)，高于正常静脉组， 差异有显著性(P0.05)，高于术后第一天组，差异有显著性(P0.05)；之后缓慢 下降。 3、免疫组化示：PCNA  阳性细胞百分比在正常静脉组为(6.07%±1.1%)；术 后第 1天开始略有下降(5.05%±0.9%)， 与正常静脉组比较差异有显著性(P0.05)； 至术后第  3  天组开始上升(11.26%±1.6%)，与正常静脉组比较差异有显著性 II  万方数据 摘要  (P0.05)；至术后第 7 天达到高峰(31.2%±3.4%)，高于正常静脉组，差异有显著 性(P0.05)，高于术后第一天组，差异有显著性(P0.05)；之后缓慢下降  4、TUNEL 法示：凋亡细胞在正常静脉组表达极少，为(1.49%±0.2%)，术后 第 1天即达高峰(18.02%±1.9%)，与正常静脉组比较差异有显著性(P0.05)；至术 后第 3 天组开始下降(7.29%±0.7%)，与正常静脉组比较差异有显著性(P0.05)； 至术后第 7 天降为(2.09%±0.5%)，与正常静脉组比较差异有显著性(P0.05)；之 后持续维持在低水平。  5、透射电镜观察显示术后第一天组电镜下可见核仁消失、染色质边集；术 后第  3 天组可见合成型平滑肌细胞，含大量高尔基体以及粗面内质网。以及凋 亡晚期的标志