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电针调节Noggin表达对VD大鼠学习记忆过程中海马神经发生的影响.pdfVIP

电针调节Noggin表达对VD大鼠学习记忆过程中海马神经发生的影响.pdf

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电针调节Noggin表达对VD大鼠学习记忆过程中海马神经发生的影响

目 录 英文缩略词 …………………………………………………………………………Ⅰ 中文摘要 …………………………………………………………………………Ⅱ ABSTRACT …………………………………………………………………………Ⅳ 前言………………………………………………………………………………1 一、材料与方法……………………………………………………………………3 (一)实验材料…………………………………………………………………3 1.实验动物………………………………………………………………………3 2.主要实验试剂………………………………………………………………3 3.主要试剂配制…………………………………………………………………4 4.主要仪器设备………………………………………………………………6 (二)实验方法……………………………………………………………………7 1.制备大鼠慢性脑缺血动物模型………………………………………………7 2.动物分组及处理………………………………………………………………7 3.电针治疗方法…………………………………………………………………7 4.BrdU 标记 ……………………………………………………………………8 5.指标检测及方法………………………………………………………………8 5.1 神经行为学观察:Morris 水迷宫实验……………………………………8 5.2 RT-PCR 半定量检测神经诱导因子Noggin………………………………8 5.3标本的制备…………………………………………………………………10 5.4海马组织形态学观察………………………………………………………11 5.5BrdU 免疫组化染色…………………………………………………………11 5.6 BrdU 与GFAP及BrdU 与NeuN 荧光双标染色………………………………12 5.7计数…………………………………………………………………………13 (三)统计学方法…………………………………………………………………14 二、结果 …………………………………………………………………………15 (一)实验大鼠造模情况…………………………………………………………15 (二)Morris 水迷宫实验……………………………………………………………15 1.定位航行实验………………………………………………………………15 万方数据 2.空间探索实验…………………………………………………………………16 (三)海马组织形态学………………………………………………………………17 (四)电针对海马组织Noggin mRNA 表达的影响 …………………………………17 (五)海马NSC 的增殖情况…………………………………………………………18 (六)海马Noggin mRNA 含量与BrdU 阳性细胞数的相关性分析………………19 (七)海马NSC 的分化情况…………………………………………………………19 1. BrdU 与NEUN 荧光双标………………………………………………………19 2. BrdU 与GFAP 荧光双标………………………………………………………20 三、分析与讨论……………………………………………………………………22 (一)祖国医学对血管性痴呆的认识……………………………………………22 (二)选穴依据…………………………………………………………………22 (三)现代医学对血管性痴呆的认识……………………………………………23 1.VD 发病的影响因素…………………………………………………………23

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