第五讲酶化学研究.ppt

酶不同于一般催化剂的特点： 高效性: 酶的催化效率通常比非催化反应高108～1012倍，比一般催化剂高 107～1013倍。 专一性： 绝对专一性：有的酶只能作用于特定结构的底物，进行一种专一的反应生成特定结构 的产物。 相对专一性：大多数酶作用于一类化合物或一种化学键。 立体异构专一性：一些酶仅能催化一种立体异构体进行反应，或其催化的结果只产生 一种立体异构体，酶对立体异构物的选择性称为立体异构特异性 （stereospecificity）。 不稳定性：常温、常压、中性pH 可调节性 酶活性的调节 关键酶 别位调节 共价调节 同工酶 多酶体系 多功能酶 酶原激活 酶含量的调节 酶蛋白合成的诱导 酶蛋白合成的阻遏 酶蛋白的降解 三、酶的催化机制 酶如何同底物结合？ 酶如何加速化学反应？ (一)酶与底物的结合 1、锁钥结合学说 2、诱导契合学说 酶在与底物结合前，酶的构象并不适于与底物结合，当底物靠近酶时，底物与酶的相互作用，从而使酶的构象发生适应性变化，从而使酶向适于与底物结合的改变。 A. 二氢叶酸还原酶（蓝色）与NADP+（暗红色）结合前无口袋状结构。 B. 在NADP+的诱导下，酶形成一个口袋状结构容纳NADP+ ，形成E-S复合物。 （二）反应的加速 1、邻近效应和定向排列 在酶的作用下，底物可聚集到酶的活性中心部位，它们相互靠近 形成利于反应的正确定向关系，使底物有充足的时间进行反应，同时 底物与酶活性中心结合时，也可诱导酶蛋白发生一定构象变化使其催 化基团和结合基团正确排列定位，利于底物和酶更好地互补，这过程 是邻近效应（proximity effect）和定向排列（orientation arrange） 2、多元催化 酶活性中心上有些基团是质子供体（酸）有些是质子受体（碱）， 也就是说即可起亲核催化，又可起亲电子催化作用,即酶具有多元催化（multielement catalysis）作用。 胰蛋白酶中丝氨酸残基-OH基团中的O原子有非共用电子对发挥亲核作用，攻击底物肽键中羰基中的C（具有部分正电性）导致肽键的断裂，形成一个不稳定的中间产物－酰基化酶，后者易将酰基转移给水完成水解作用。 A- : B+ 亲电基团—— Mg2+、 Mn2+ （有空轨道） 亲核基团—— ¨ + -OH (有孤对电子) 亲电催化 2A- : B+ + Mg2+ A: Mg ¨ A + 2B+ 亲核催化 ¨ -OH ¨ -SH A- + HO :B 中间产物不稳定，断裂，相互结合形成产物，酶复原。 （不同酶促反应中的催化因素影响大小不同。） 3、表面效应（surface effect） 酶分子表面由亲水基团构成，而内部常为疏水性氨基酸组成，并常形成疏水性“口袋”样结构，酶活性中心多位于此疏水“口袋”中，即底物与酶的反应在酶分子内部疏水环境中进行。 第四节 酶促反应动力学 酶促反应动力学（kinetics of enzyme-catalyzed reactions）是研究酶促反应的 速率以及影响反应速率各种因素的科学。 影响酶促反应速率的因素有: 酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂及激活剂 酶的反应速率：即酶促反应的速率，是单位时间 内底物分子消失的速率或单时间 内产物的生成速率。 E＋S ? ES ? E＋P 反应初速率：反应开始时的速率，即反应速率与 反应时间呈正比阶段。 采用初速率可避免反应进行过程中因底物浓度消耗而导致速率下降，或因反应产物堆积、酶被饱和及部分酶失活而造成的反应速率下降等。 1、酶浓度的影响 当底物浓度充足的前体下，酶浓度与酶促反应速度成正比。 ν ＝k[E] ν ：为反应速度 k ：为速度常数 [E] ：为酶浓度 2、底物浓度的影响 底物浓度与反应速率呈矩形双曲线 a段：在酶促反应起始时阶段反应 速率迅速增高呈直线上升， 这时反应速率与底物浓度呈