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实验二、定量测定蛋白质
分光光度法;(一)基本原理;（二）待测溶液的浓度计算;根据Lambert-beer定律：
标准管：As=KLCs (下标S：标准液)
待测管：Ax=KLCx (下标X：待测液)
L相等，温度相同，测定同一物质，所用单色光相同，则K相同，则： As/Ax=Cs/Cx即Cx=Ax/As·Cs
在实际操作中，常使待测管体积与标准管体积相等(以X代表测定管含量，S代表标准管含量)则：
X=Ax/As·S
计算待测溶液浓度时，可根据测定时实际吸取的标准液的体积(Vs)和待测样品的体积(Vx)，将上式演变为：
待测溶液浓度：Cx=Ax/As·Cs·Vs/Vx;利用标准曲线进行换算;2．标准曲线的作法;【操作】;3、标准曲线图的绘制;标准曲线;利用吸光系数（消光系数）求出待测溶液的浓度;(三)波长的选择;最大吸收峰的波长(λmax)
根据三个原则：
1.被测溶液有适当的光密度，适当的光密度为0.1- 0.7，以0.2- 0.6最理想。
2.应使干扰影响降低至最低限度。
3.应使标准曲线在尽可能大的范围内接近直线。;蛋白质定量分析技术;双缩脲法
紫外分光光度法
BCA（二喹啉甲酸）法
Lowry法(Lowry改良法)
考马斯(Comessie)亮兰结合法
凯氏定氮法
;双缩脲法测定蛋白质含量;双缩脲(NH2CONHCONH2)在碱性溶液中与硫酸铜反应生成紫红色化合物，称为双缩脲反应。
蛋白质分子中含有许多肽键(-CONH-)在碱性溶液中也能与Cu2+反应产生紫红色化合物。在一定范围内，其颜色的深浅与蛋白质浓度成正比。
操作简便、迅速、受蛋白质种类性质的影响较小；
灵敏度较差，特异性不高。-CONH2、 -CH2NH2、
-CS-NH2等基团也有此反应。;【操作】;【结果】;原始数据记录;实验报告
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