利用高效毛细管电泳测定真菌代谢产物吲哚乙酸含量.pdfVIP

江苏农业科学 2011 年第39 卷第3 期 一 439 … 马晓颖，贸东贝，李冰字，等.利用高效毛细管电泳测定真商代谢产物呼|咏乙酸含最[1].江苏农业科学，2011 ， 39(3) :439 -44 1. 利用高效毛细管电泳测定真菌代谢产物p~1 噪乙酸含量 马晓颖1 ，贾东贝1 ，李冰宇\杨涛2 ，五红2 ，肇萤2 (1.沈阳农业大学土地与环境工程学院，辽宁沈阳 110161; 2. 辽宁省农业科学院生命科学中心，辽宁沈阳 110161 ) 摘要:建立真商代谢产物P~I喋乙酸的高效毛细管电泳检测方法，具体探讨缓冲榕液的种类、浓度、酸碱度，检测披 唱 长、有机添加剂及操作电压、进样时间等因素对枪测结果的影响。结果表明，以 N~肌0 NaH P0 (N~B407 浓度为 7 2 4 20 mmo.νL) 为搜冲液，在进样时间20 s 、检测被长2∞ nm、分离高压30 川、pH 值9.0 的碱性条件下可以检测咽喋乙酸 含麓，检测的钱性?也周为 O. 1 - 50. 0 mglmL，回归方程为 y 百 11 460x -1 226 ，相关系数 r 为 0.99992 ，检出限为 0.15μ将!mLo 关键词:日引喋乙酸;真菌;高效毛细管电泳;测定 中固分费号: 5144 文献标志码:A 文章编号:1002 -1302! 加11 )03 础。439 叩 02 P~I喋乙酸(IAA) 是→种植物生长素，…般分布在植物的 尼柯(上海)仪器街限公司] ;Caωada™实验室趟纯水系统。 1. 2 试剂与样品 顶端，有促进植物生长的作用。目前，有大盘研究表明微生物 的代谢产物中含有叼|噪乙酸等植物激素itlo 马天瑞将能分 略|味乙酸标样(北京奥博墨生物技术有限责任公司) ;试 泌51蝶乙酸的根瘤商菌株接种于小麦( Triticum aestivum L. ) 验过程用的试剂均为分析纯利色谐纯:试验用水为超纯水。 利燕麦(Avena satíva L. )上，产生了明显的促生效应以]。徐幼 标样熔浓的配制:精密称取自51 牒ι酸标准晶 10.01吨，提于 1∞ rnL 容量瓶中，用乙醇稀释!Iâ剔度线，摇匀。越商披辅助 平等将产51味乙酸的阴沟肠杆菌发酵液(16 倍稀释液)啧施 提取30 min. 提取液0.2 mL 转移到2 mL 离心管中，加级冲液 于甜玉米幼苗朔的叶丽，2 周后植株生伏明显加快，与对照相 稀稀烹刻度线。 10 饥JO r/min 离心 15 mín. 用0.22μm 孔锚 比，其株商增加了 25.549品，槌株根系发达，根系干重较对照 增加2.19 倍[3] 。目前，真菌产时|噪乙酸的报道主要以内生商 的有机滤膜过滤，弃去初滤液，收集续滤被作为对照品溶液。 1. 3 方法 银菌为主，有关根际真菌产蝴蝶:乙酸的研究报道相对较少。 1. 3.1 根际真菌的分离鲍化($] 将根系自土块中取出，轻轻 目前.51瞧乙酸的分析方法主要