化学反应法在活性氧测定中的应用及研究进展.pdfVIP

动物营养学报2013 ， 25(9) :1946-1953 Chinese Joumal ofAnimal Nutrition doi:10.3969/j. i臼n.1006-267x.2013.09.006 化学反应法在活性氧测定中的应用及研究进展 邹轶彭健* (华中农业大学动物科技学院，武汉 430070) 摘 要:活性氧由于在人的衰老和疾病中扮演了重要的角色，在现代医学和分子生物学领域越 来越受到人们的关注。体内活性氧水平作为机体遭受氧化损伤的重要指标，是区分生理和病理 状态的关键问题。但活性氧由于反应活性高和半衰期短的特点，在体内和体外的准确测定仍然 是一项难题。本文从活性氧化学反应法的测定原理和研究进展2 个方面对分光光度法、化学发 光法、荧光光度法和电子自旋共振法等4 个化学反应方法进行综述，比较这几种方法在实际应 用中的不同。 关键词:活性氧;分光光度法;化学发光法;荧光光度法;电子自旋共振法 中图分类号:0653 文献标识码:A 文章编号: 1006-267X (2013) 09-1946 -08 关注。对于直接影响机体的 ROS ，由于 ROS 具有 正常的生理环境下，由于线粒体内氧化还原 寿命短、反应活性高(表 1) 的特点，对于 ROS 的准 链的作用，占体内总耗氧量2% 的氧气转化成超氧 化阴离子自由基(0 - • )和一氧化氮自由基 确测定仍然很困难[5-6] 。因此，简单、重复性好、 2 (NO. )等活性氧 (reactive oxygen species , 敏感且经济有效的 ROS 测定方法在现代自由基分 ROS)[1] ，由于体内抗氧化系统的作用，机体产生 子生物学中具有重要的意义。根据 ROS 的理化特 性，目前用于 ROS 测定的主要方法有化学反应法、 的 ROS 可被及时地清除。 ROS 在体内维持生成 捕捉法、酶联免疫吸附测定(ELISA) 法、高效液相 和降解的动态平衡，从而保证机体的正常生理功 能[2] 。当机体遭受感染、应激、过度的运动、有害 色谱(HPLC) 法、气相色谱-质谱联用( GC-MS) 的环境污染物、紫外光照等时，0 - .、NO. 、握自 法、免疫印迹法、电洗脱法、等电聚焦法、伏安法 2 等[7 -9] 。其中，化学反应法由于其具有灵敏度高、 由基( .OH) 、烧氧自由基(RO. )、氢过氧化物自 由基(ROOH. )、单态氧(10 )、碳酸盐负离子自 廉价和操作简便的特点，越来越广泛的被用于生 2 由基(C0 - • )和过氧化氢(H 0 )等 ROS 在体内 物反应中 ROS 的测定。化学反应法是指由于 3 2 2 ROS 具有较高的反应活性，能够与许多不同的化 所占比例大幅提升[3] 。当 ROS 在体内生成过多或 合物发生化学反应，产生各种不同的反应生成物。 清除过程受阻时，其数量快速增加，形成累积时高 根据这些反应生成物或反应物的变化程度，通过 氧化活性的 ROS