肽和乙酰化肽的制备及其对绵羊胃肠道内肽的降解、流通和氮平衡的影响.pdfVIP

摘要 本论文包括以下研究内容：通过酶解豆粕的方法制备大豆肽，然后以氮端乙酰化的方法对 大豆肽进行过瘤胃保护处理，得到最适处理条件。分别以豆粕、大豆肽、乙酰化大豆肽作为蛋 白质饲料饲喂绵羊．分析三者在瘤胃和机体代谢的特点，考察肽在反刍动物方面的营养优势， 以及乙酰化肽过瘤胃的效果和可利用效率。 一、以豆粕为原料制备大豆肽和乙酰化大豆肽的工艺研究 选用2709碱性蛋白酶水解大豆粕，预处理条件为：90℃水浴加热10分钟：最适酶解条件 条件下水解，可以得到水解度25％以上，平均肽链长度4．0的大豆肽溶液。将水解液离心，通 过超滤柱获得分子量3000以下的清亮肽液，喷雾干燥制得肽粉。租蛋白含量66．83％(以干物质 计1。 将肽粉按5％(W／V)蛋白浓度，溶于去离子水中，用乙酸酐作为酰化试剂，获得最佳酰化条 小时。在此条件下获得虽终酰化度80％以上的乙酰化肽溶液。喷雾干燥制得乙酰化肽粉。粗蛋 白含量50．96％f以干物质计)。与肽粉产品相比，乙酰化肽粉产品的粗蛋白含量降低，原因是在 维持反应的酸碱度时，加入氢氧化钠，生成了大量氯化钠，而使蛋白含量降低，灰分含量升高。 二、大豆肽和乙酰化大豆肽在绵羊胃肠道的降解、流通以及体代谢和氮存留情况的研究 以绵羊为试验动物，设不添加蛋白饲料的基础日粮组为对照组，分别添加豆粕、大豆肽、 乙酰化大豆肽作为氨基酸来源做对比试验。结果显示，乙酰化肽组饲喂后氨态氮的产量及随时 间的浓度变化都显著低于豆粕组(pO．05)，数值上低于肽组，但差异不显著(p0．05)，肽组 各采样时间点的氨态氮值变化趋势与豆粕组接近，但产量比豆粕组低些，差异不显著。各组各 时间点的瘤胃液口H值变化特点相似，从数量上比较，由高到低依次为肽组、酰化肽组、豆粕 组、对照组。测定不同氨基酸来源下，绵羊瘤胃内肽结合氨基酸(PAA)、游离氨基酸(FAA) 浓度随饲后时间动态变化，由结果可以看出，PAA的降解规律明显与其它组不同，在饲后lhr， 其它三组呈现较平缓的下降趋势，而乙酰化肽组的瘤胃PAP,浓度却达到最高值，在这一时间点 的值，乙酰化肽组分别是肽组的4．27倍、豆粕组的9．47倍、对照组的13．20倍：在随后的4hr 内，乙酰化肽组的瘤胃PAA浓度一直高于其它三组，数量在逐渐减少，但下降的程度比较缓慢， 显示了乙酰化肽的确有抵抗瘤胃肽酶活性作用的特点。 过瘤胃的队A量(即十二指肠液PAA流量1研究显示，PAA流量数值由大到小为乙酰化肽 组肽组豆粕组，但差异不显著(口，0．05)。其中乙酰化肽组的PAA中个别氨基酸(蛋氨酸和 酪氨酸)流量显著高于其它组(p0．05)，说明过瘤胃保护肽可以一定程度地纠正和改善到达绵 羊小肠的氨基酸组分与含量。 分别在豆柏组、肽组和乙酰化肽组的饲前0hr与饲后2．5hr，采集颈静脉血，测得三组相同 时间点的血浆FAA总含量差异不显著(p0．05)，采食前后的变化特点均为采食后浓度下降， 巾国农业大学坝L学位论文 摘要 量，肽组与乙酰化肽组显蒋少于豆粕纲。 分别在豆粕组、肽组和乙酰化肽组记录动物采食量、排粪尿量并收集粪尿样本，计算氮存 留。结果显示，在氮食入量差异不显著的情况F，肽组和乙酰化肽组的粪氮、尿氮排出搓均显 著小于豆粕组0O．05)，可消化氯和氦的表观消化率都显著高于豆粕组(po．05)，沉积氩、饲 料氮的表观生物学价值和沉积氮与可消化氮之比均极显著的高于豆粕组(po．01)，其中乙酰化 肽组氮的表观消化率极显著地高于豆粕组(p0．01)，结合前面试验中瘤胃液和十二指肠液的 肠灌注乙酰化肽所得的结果报道一致。 关键词：大豆肽，乙酰化大豆肽，制备，过瘤胃，氮平衡，绵羊 II 中国农业大学砸I．学位论文 Abstract Abstract This includestwodistinct ofthe of from peptide study pansconsistingpreparationacetylate