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标 准 文 件 Standard document 文件编号 Document No. SOP-LOP-790-8/00 高效液相色谱仪校验规程 Calibration SOP for HPLC 页 码 Page 1 / 9 状 态 Status 正式 Formal 备 份 号 Control No. 起 草 人 Written by 起草日期 Written date 年 月 日 颁发部门 Issued department 质量管理部 Quality department 审 核 人 Reviewed by 审核日期 Reviewed date 年 月 日 批 准 人 Approved by 批准日期 Approved date 年 月 日 生效日期 Effective date 年 月 日 分发部门Distributed department：质量负责人 质量管理部 QA QC 1、目的Objective建立 2、范围Scope本规程适用于3、职责Responsibilities3.1 培训职责：起草人或审核人或批准人对质量管理部全体人员培训。 3. 3.3 QA：4、定义Definition 5、程序Procedures2002液相色谱仪，安捷伦液相说明书μm。 5.2.6 容量瓶：10ml。 5.2.7玻璃注射器。 5.2.8 限流阻尼管。 5.2.9 分析天平。 5.秒表校 验 项 目 指 标 流量设定值(ml/min) 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 流量设定值误差，|SS |＜ 5% 2% 2% 2% 2% 流量稳定性误差，SR ＜ 3% 2% 2% 2% 2% 校 验 项 目 指 标 温度设定值 (℃) 温度设定值误差 |△T|＜2℃ 控温稳定性误差 TC ≤1℃ ≤5.0% 5.3.4进样器性能测试 表4 校 验 项 目 指 标 进样器精密度测试： 定性重复性(Rt)RSD定性 ≤ 1.0% 定量重复性(峰面积) RSD定量 ≤ 2.0% 自动进样器线性测试*： 相关系数R 响应因子f的RSD ≥0.999 ≤5.0% 5.3.5梯度组成的测试* 表5 校 验 项 目 指 标 梯度准确度 |TSH-MSH|≤2% 梯度准确度的精密度 ≤0.5% 注：*表示该项目的内部校验取决于仪器的配置，有该配置则为必检项目。 5.4 校验方法 5.4.1校验通则 5.4.1.1 HPLC的内部校验由仪器所属部门经培训的使用者按本规程进行校验，其校验项目依仪器配置和使用范围而定。 5.4.1.2 政府部门每一年对HPLC进行校验，每六个月内部对HPLC进行一次校验；仪器配置的关键部件大修或更换后，可参考本规程对该部件相关的项目进行校验，以对仪器的性能进行确认。 5.4.1.3 校验时，同时检查、确认仪器的安装，使用环境符合要求，仪器处于正常的状态下，并检查、确认仪器的接线牢固，接地良好。 5.4.1.4 不同配置的仪器，须按照规定的校验项目及指标进行内部校验，以保证该仪器的所有使用功能均进行了校验。 5.4.2 泵性能的测试－SS和SR的测定 5.4.2.1 测试条件： 流动相：水； 色谱柱：限流阻尼管。 5.4.2.2 测试： 分别设定流速为0.5ml/min， 1.0ml/min，1.5ml/min，2.0ml/min，2.5ml/min等值进行校验，这些流速覆盖了实验室使用的流速范围。待流速稳定后，在流动相流出口处用容量瓶准确地收集流动相10.0ml，同时用秒表计时，各测量3次，按公式(1)、(2)计算SS和SR，并以下表所列内容记录测试数据和结果。 表6 泵性能的测试 泵流量设定值： 流动相体积： 次数 项目 1 2 3 收集时间t(秒) 流量实测值Fm(ml/min) 泵流量设定值误差SS 泵流量稳定性误差SR 5.4.3柱温箱温度稳定性测试—△T 和Tc的校验 5.4.3.1测试 将测温仪之热电偶固定在柱温箱中央，关好柱箱门。以限流阻尼管替代色谱柱，分别设定柱温箱温度为20℃，25℃，30℃，35℃，40℃等值进行校验，这些温度覆盖了实验室使用的柱温范围。待测温仪指示温度稳定后，记录温度显示值，每隔5分钟测一次，每个温控点测定1小时，求出平均值，并以下表所列内容记录测试数据和结果。设定值与平均值之差为设定值误差△T，13次测量值中最大值与最小值之差为控温稳定性误差Tc。 表7 柱温箱温度稳定性测试 温度设定值： 次数 项目 1 2 3 4 5 6 7 8 9