《微生物耐药基础和临床》2013第二讲1 抗菌药物与细菌耐药概述.pptVIP

* 目前对细菌菌膜产生的耐药机制的研究还不很深入，主要有以下几种解释： 1）抗菌药物不能透过整个菌膜，因而难以对包裹在菌膜深处的细菌发挥作用； 2）菌膜对抗菌药物敏感性降低，其原因在于细菌形成菌膜后处于营养限制状态，其代谢能力极低，而抗菌药物往往对处于代谢旺盛期的细菌是敏感的； 3）推测在菌膜内的细菌具有一种独特的生物学特性，从而能够抵御抗菌药物的作用。 * 2、药物作用靶位的改变 抗菌药物作用的靶位的变化： 靶位的结构发生细微变化，亲和力降低， 靶位的过度表达或缺失， 产生新的靶酶。 * β内酰胺类抗生素耐药： PBPs的变化 喹诺酮类抗生素耐药： DNA螺旋酶、拓扑异构酶IV变构。 氨基糖苷类抗生素耐药： 核糖体30S亚基或50S亚基的靶位点发生改变。 磺胺类抗生素耐药： 二氢叶酸合成酶或二氢叶酸还原酶与磺胺类药物亲和力降低，或靶位酶的合成量增加 。 2、药物作用靶位的改变 * 靶位改变－－对β内酰胺类抗生素耐药： 正常PBPs：PBP1，PBP2，PBP3，PBP3’，PBP4 PBP2aPBP-2’ MRSA表葡菌 PBP1a/1b PBP2a/2x/2b 肺炎链球菌 5种相似PBP 肠球菌 * 3、外膜通透性的改变 原来允许某种抗菌药物通过的孔蛋白通道关闭或消失，或产生新的蛋白阻塞了细胞壁通道，抗菌药物无法进入细菌内发挥作用。 主要见于G－菌。 G－杆菌外膜对青霉素G有天然屏障作用 对广谱青霉素类、头孢菌素类的耐药； 对氨基糖苷类耐药；对四环素耐药。 * 外膜 周浆间隙 细胞膜 脂多糖 脂蛋白 肽聚糖 脂多糖 脂质双层 G－菌细胞壁 孔蛋白，与抗菌药物的进入有关 * 4、细菌药物主动转运的耐药机制 细菌对抗菌药物的主动泵出作用（需能量） 主动药物转运（active drug efflux) 由外膜通道蛋白、融合蛋白和胞质膜蛋白构成。 产生非特异性、低水平、多重耐药，如对β-内酰胺类，大环内酯类，四环素类、氯霉素类及喹诺酮类耐药 主动泵出系统过度表达，也可致高水平耐药。 在大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金葡菌、表葡菌等。 * G－菌主动外排系统 内膜转运蛋白 内膜膜融合蛋白 三联外排系统 * 铜绿假单胞菌的外排系统 内膜转运体 (MexB、MexD、 MexF、MexY、MexI和MexW) 膜融合蛋白 (MexA、MexC、MexE、MexX、MexJ、MexH等） 外膜蛋白 ( OprM、OprJ、OprN和OpmD) 如MexAB-OprM，MexAB- OprJ泵 * * 李显志 　 * 降低细菌固有耐药水平，逆转获得性耐药， 通过抑制ATP结合膜糖蛋白实现其逆转活性 ：利血平、维拉帕米、环孢素A、他莫昔芬 与膜蛋白结合的：N 右旋维拉帕米等。 抑制质子梯度外排泵的外排作用：质子动力解偶联剂氰氯苯腙( cccp ) 等。 EPIs本身无抑菌作用，但与某类抗生素合用可显著提高其对由因外排泵系统产生耐药的耐药菌的作用。 EPIs有望成为恢复菌体对药物的敏感性、提高临床疗效的一类新药。 外排泵抑制 (efflux?pump?inhibitor,?EPI) 氟喹诺酮、大环内酯、 β-内酰胺类抗生素 * 5、细菌生物被膜的耐药机制 细菌生物被膜 细菌菌膜的形成机制 细菌菌膜的耐药性机制 * 细菌生物被膜（biofilm, BF） BF 是存在于液体环境中被膜样的细菌群落。由附着于实体表面的细菌细胞及由其自身分泌的含水聚合性基质包裹形成的细菌群落。 是一种在液体环境中与游走细胞相对应的细菌群体存在形式。 在自然界细菌多以生物被膜存在， 可吸附于惰性或活性实体表面， 如机体粘膜或生物医学材料表面。 * 细菌生物被膜的形成 * 铜绿假单胞菌生物被膜结晶紫染色光镜照片（×1000倍） PA生物被膜模型 1d 7d 6d 4d 3d 2d * The biofilm-forming ability and genotype of P.aeruginose isolates Biofilm formation Strains and genotype* Total (percentage) None (-) 18(B)，28(C)，40(B)，41(C)，42(B)，44(A)，45(A) 7(14.6％) Weak (+) 1(A)，3(B)，4(A)，6(C)，12(B)，25(C)，26(A)，32(C)，34(C)，37(C)，38(B)，39(A)，46(C)，47(C)，48(C) 15 (31.3％) Moderate (