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反义微小RNA-21寡核苷酸对食管癌EC9706细胞生长的抑制作用
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·实验研究·
反义微小RNA一21寡核苷酸对食管癌
EC9706细胞生长的抑制作用
潘雪李向楠
【摘要】 目的观察微小RNA-21(miRNA-21)反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞的生长抑
制作用。方法反义寡核苷酸转染食管癌EC9706细胞，噻唑蓝(MrItI’)法检测细胞生长抑制率，实
时荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)检测细胞miRNA-21水平，流式细胞仪检测细胞凋亡，FQ-PCR
检测程序性细胞死亡因子4(PDCD4)mRNA表达水平，免疫荧光检测PDCD4蛋白表达。结果反
义寡核苷酸抑制细胞活性的最佳浓度为0．5ixmol／L，转染反义寡核苷酸后细胞内miRNA-21的表达
水平明显下调为无义组的0．045±0．021，细胞凋亡明显增加为12．95％，生存率显著降低为
(48．21-4-9．56)％，差异有统计学意义(P0．05)。反义寡核苷酸组中PDCD4mRNA相对表达增高
为0．452±0．002，且蛋白质表达水平增高，差异有统计学意义(P0．05)。结论miRNA-21反义寡
核苷酸可通过上调PDCD4有效抑制食管癌EC9706细胞增殖并促进凋亡。
【关键词】微小RNA-21；食管癌；反义寡核苷酸；程序性细胞死亡因子4
MicroRNA一21antisense toinhibitthe ofEC9706cellsPanXue‘．“
oligonucleotidesgrowth
Zhou
Xiangnan．‘TkNursing of Uniwersity，Zhengzhou450052，China
CollegeZheng
author：LiXiangnan．Email：lxn一2000@163．con
Corresponding
Toobserve antisense inhibition
Objective micmRNA(miRNA)一21
【Abstract】 oligonucleotide
the of ofEC9706 blue
of EC9706cells．MethodsAntisense ceUs．tetrazolium
growth olignnucleotides
ofcell inhibition fluorescent chainreaction
(Mar)assaygrowth rate，real—time quantitativepolymerase
leveldetectioncell flow celldeath4
(FQ—PCR)miRNA-21apoptosisby cytometry，FQ—PCRpmgramuned
(PDCD4)mRNAlevels．immunofluorescencePDCD4 The
expression proteinexpression．Resultsoptimum
concentrationofantisense inhibiIscell Was0．5 transfectionofantisense
oligonucleotideactivity trmol／L．after
levelsofintracellularmiRNA一21 lowerfornon—definedof
oligonucleotideexpression significantly group
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