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稻瘟病菌非组蛋白MNH6基因的功能研究
卢建平1t2冯晓晓2,刘小红2,王洪凯1,林福呈1+
(1.浙江大学华家池校区生物所,杭州310029;2.浙江大学华家池校区生命科学院,
杭州310029;+E-mail:fuchenglin@zju.edu.cn)
稻瘟病是水稻生产上危害最为严重的真菌病害之一,对世界粮食生产造成巨
大损失。稻瘟病菌的侵染过程包括分生孢子萌发、附着胞形成、侵染钉分化和侵
染菌丝扩展等一系列错综复杂的过程,其中每一环节都是由一批基因控制的。近
几年,对于稻瘟病菌附着胞形成和侵染过程中的基因功能研究有了很大的进展,
但是对于非组蛋白在稻瘟病菌的侵染过程中的作用研究很少。在酵母中,两个重
因缺失突变体Anhp6在形态和细胞骨架上都发生了变化,并且突变体对于饥饿敏
感。我们在稻瘟病菌成熟附着胞的差减文库中找到NHP6的同源基因(登陆号:
CK828204),该基因在附着胞阶段丰富表达。通过PCR的方法在稻瘟病菌附着
11,396
的同源基因,属于DNA非特异结合蛋白HMGB家族。
利用基因缺失技术,通过转化基因缺失载体pBS.MNH6,得到单拷贝插入的
因缺失引起的,构建了互补载体pSl21.HB,得到互补突变体s121HBl。通过
变体,s121HBl是基因恢复突变体。
基因缺失突变体Amnh6的菌落形态、生长、产孢量和孢子形态都发生了明显
的变化。突变体Amnh6的茵落呈白色,生长速度只有野生型的80%,分生孢予细
长,产孢量为野生型的50%。MM弧基因缺失不影响孢子的萌发,但是,附着胞
形成率下降,突变体Amnh6仅有70%的孢子可以形成附着胞。致病性测定(离体
和喷雾接种)发现:突变P)fAmnh6对于感病水稻品种CO.39和大麦都没有致病性。
综上所述,膨僦因影响到稻瘟病菌的菌落形态、生长、分生孢子形态、
附着胞形成和致病性。与酵母相比,稻瘟病菌是病原菌与植物互作的模式系统,
而且具有更复杂的生活史和病害循环过程,因此,在稻瘟病菌中研究非组蛋白的
功能具有更重要的意义。
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