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论文信息 题名：Extraction of Flavonoids and Quantification of Rutin from waste Tobacco Leaves 废弃烟叶中黄酮类的提取与芦丁的含量测定 刊名：Iranian Journal of Pharmaceutical Research 作者名：Fatemeh Fathiazada, Abbas Delazara, Roya Amiria and Satyajit D. Sarker 刊期：2006 第 5卷 第 3 期 页码： 222-227 Abstract 该论文对废弃烟草作为芦丁等黄酮类药物来源的潜在价值进行了研究。 分离出芹黄素、槲皮素和芦丁三种黄酮类，通过UV、NMR 对其结构的鉴定，并用HPLC对发酵前、发酵后、废弃烟草的芦丁含量进行了测定，分别为1.5%、0.5%、0.6%。 Introduction 吸烟有害健康，然而烟草仍是有巨大药用价值的植物。它富含生物碱和黄酮类物质。 芦丁是一个著名的天然抗氧化剂。是温和的血管收缩剂，可以减轻毛细血管脆化、肿胀和瘀伤 。用于治疗静脉功能不全，改善微血管血流量 。 它还可以诱导cAMP的合成，抑制磷脂酶、超氧化物歧化酶，抑制血小板的分泌和聚集 。 仪器 NMR 200 MHz (Bruker spectrospin 200) UV-Visible spectrophotometer (Shimadzu,2100) HPLC (Shimadzu, LC-8A) 试剂 methanol, petroleum ether, chloroform, ethyl acetate, n-butanol ，rutin standard 材料 dried fermented, unfermented and the wastes of tobacco Extraction and Isolation 100g干燥粉碎的烟草用70%甲醇溶液浸渍提取 50℃减压浓缩提取液得到烟草水提液 用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取水提液 。经过TLC检测乙酸乙酯部位黄酮类含量最高。 对该部位进行柱层析分离，洗脱剂分别为乙酸乙酯，乙酸乙酯 -甲醇-水(70-15-5) ，甲醇-水 (85-25)，流速 6 drops/min。用TLC进一步检测和纯化各个组分，在紫外灯和氨蒸汽下显色。 最终分离出三种黄酮类物质，进一步通过UV、NMR波谱法阐明其结构 HPLC analysis 色谱柱： Shim-Pack CLC-CN (6x 150 mm ID) 条件：磷酸缓冲液(PH=2.6)-甲醇-二恶烷(100-6-6, v/v/v)，流速1.5 mL/min ，上样量20 μL，柱箱温度为室温，在359nm检测。 标准品：0.1mg/ml芦丁溶液，过0.45 μm滤膜 样品的制备：1g材料（60目），30ml溶剂室温浸提12h，3次，过滤定溶到100ml，过0.45 μm滤膜。 Result and Discussion 紫外光谱测定黄酮类结构的原理 诊断试剂 ：能够导致光谱发生变化，据此变化可以判断化合物结构，对结构具有诊断意义的试剂 NaOMe：4’-OH，3、4’-dyhydroxy 或 3、3’、4’-trihydroxy AcONa：7-OH（△ 5-20nm ） AcONa/H3BO3： ortho dihydroxy（5，6- dyhydroxy除外） AlCl3及AlCl3/HCl： 5-OH ， ortho dihydroxy * * 废弃烟叶中黄酮类的提取与测定 芦丁也被用作在食品着色剂、添加剂 ，并在化妆品中也有应用。 芦丁的原料槐米、桉树、荞麦科和芸香科的植物。找到更好或更经济的芦丁和其他类黄酮的生产原料也是有必要的 芦丁是烟草中发现的具有重要药用价值的黄酮类物质。它占烟草干重的1%（Miller，1973） 烟草生产中产生大量的烟草废弃物。 烟草废弃物用作黄酮类物质生产原料很有潜力。 Experimental （1） （2） （3） （1）Apigenin 芹黄素 （2）Quercetin 槲皮素 （3）Rutin 芦丁 NMR Spectroscopy UV spectroscopy 多数黄酮类化合物由两个主要吸收带组成： 带I在300-400nm区间，由B环桂皮酰系统的电子跃迁所引起 带II在240-285nm区间，由A环苯甲酰系统的电子跃迁所引起 B B A A 桂皮酰系统 苯甲酰系统