脐血单个核细胞的免疫学研究进展.docVIP

　　脐血单个核细胞的免疫学研究进展 【关键词】 脐血 单个核细胞 免疫学 综述 造血干细胞移植（HSCT）已成为治疗多种血液病、某些恶性实体肿瘤、部分遗传性疾病、重症免疫缺陷等疾病的最有效措施之一。骨髓、外周血和脐血是造血干细胞的三大。但异基因骨髓移植（alloBMT）或外周血干细胞移植（alloPBSCT）受HLA匹配供者的限制，自体造血干细胞移植又受到干细胞体外净化等问题的困扰，而脐血造血干细胞因其广泛的、较强的增殖分化能力及较弱的免疫原性而日益受到重视。临床应用已证实脐血造血干细胞移植对于重建或改善骨髓造血功能有良好疗效，具有临床应用价值［1］。脐血单个核细胞（CBMNC）是脐血移植的有效成分，因此，本文拟就CBMNC的免疫学特点作一综述。 1 脐血造血干祖细胞（HSPC）的免疫学特性 HSPC是一类具有高度自我更新和定向分化特征的原始细胞，目前尚无直接检测HSPC的方法。CD34被公认为是骨髓、外周血以及脐血的HSPC的表面标志。文献报道，脐血中CD34+细胞占有核细胞总数的2%，与成人骨髓相当（2.1%），高于外周血（0.5%）［2］。近年来，应用单克隆抗体及流式细胞技术研究发现，体内长期植活细胞仅为表达CD34+CD38-OR-Thy-的细胞群，因此检测CD34+CD38-细胞标志，可间接估计HSPC含量。 脐血CD34+细胞亚群分析显示，脐血造血干细胞中的CD34+CD38-细胞的百分比明显高于外周血和骨髓，提示脐血造血干细胞中含有较多更为原始的造血细胞。 体外细胞培养方法测定脐血中HSPC，结果显示，脐血除了含有粒单集落形成单位（CFUGM）外，还含有爆式红系集落形成单位（BFUE）、淋巴系集落形成单位（CFUL）、巨核系集落形成单位（CFUMeg）和混合集落形成单位（CFUMix）。单位数量脐血中CFUGM的含量高于动员后的外周血12～16倍，相当于或超过骨髓；脐血中的BFUE、红系集落形成单位（CFUE）的数量也高于成人外周血及骨髓。另外，脐血样本形成的集落也比骨髓形成的集落大，显示脐血CD34+CD38-细胞群克隆形成能力较成人外周血及骨髓强。 研究发现，尽管脐血中HLADR+和HLADR-两群细胞有97%的细胞处于G0或G1期，但两群细胞增殖很快，经含细胞因子液体培养36 h后仅有50%的细胞处于G0或G1期，而骨髓中80%HLADR+细胞和90%HLADR-细胞处于G0或G1期，经36 h培养后仍有80%处于G0或G1期。表明脐血中CD34+CD38-细胞对集落生长刺激因子具有更高的敏感性，细胞生长周期更短。 端粒是在所有真核生物染色体末端的富含G′C的重复DNA序列，在细胞分裂期间端粒重复序列的丢失被认为可能是细胞衰老的机制。应用DNA印迹法、荧光原位杂交法研究发现，脐血干细胞的端粒平均长度明显较骨髓干细胞的端粒长。另外，脐血HSPC的端粒酶活性高于骨髓及外周血HSPC，脐血HSPC低表达甚或不表达细胞凋亡配基CD95/Fas,因此脐血的造血增殖潜能要高于骨髓，其移植存活期比骨髓更长、更稳定。 2 脐血T淋巴细胞的免疫学特性 脐血T淋巴细胞在移植物抗宿主病（GVHD）、移植物抗白血病（GVL）和免疫调节中发挥重要作用。研究表明，脐血T淋巴细胞在表型、功能、免疫效应分子及许多膜受体的表达等方面，与成人外周血T淋巴细胞存在许多差异。脐血成熟T细胞数量不足，T细胞表面抗原标记和T细胞亚群发育不成熟，且呈异质性［3］。 脐血CD4+、CD8+、CD3+淋巴细胞绝对数量低于成人外周血，而CD4+/CD8+比值较外周血高，CD8+T细胞数低于外周血。体外去除CD8+T细胞，定量输入CD4+T细胞的供体淋巴细胞能够有效地介导针对慢性粒细胞性白血病（CML）的GVL，使BMT后复发的病人达到再次诱导缓解的效果，而GVHD的发生率较低［4］。这提示CD8+T细胞在介导人类GVHD中最为重要，而CD4+T细胞则可能有GVL效应。所以脐血CD8+T细胞数较低可能是脐血移植后GVHD发生率低、程度轻的原因之一。 CD45RA+T细胞是未经抗原刺激的原始T细胞，在受抗原刺激后转化为记忆性细胞，即CD45RO+T细胞。文献报道脐血中以CD45RA+T细胞为主，而CD45RO+T细胞显著低下。CD45RA+T细胞没有辅助功能，主要起免疫抑制作用。致使脐血移植后GVHD发生率低，但同时有可能降低GVL。 CD26是T细胞的活化抗原，现已知脐血中以CD26+CD45RA+T细胞为主（超过88%），而CD26+CD45RO+T细胞不到2%，成人外周血中CD26+CD45RA+T细胞占34%，而CD26+CD45RO+T细胞占48%。SEIJI等［5］的