粮食中麦角甾醇含量检测方法研究论文.pdfVIP

218 中国粮油学会第五届学术年会论文选集 粮食中麦角甾醇含量检测方法研究 何学超 冯永建郭道林兰盛斌张华昌 黎万武丁建武 (国家粮食局成都粮食储藏科学研究所，成都610031) 摘要 本文介绍了一种可准确、快速测定粮食中麦角甾醇含量的正相高效液相色谱法。样品皂化 后，用正己烷萃取麦角甾醇，不需要进一步纯化，直接上高效液相色谱仪分析。分析柱为Spherisorb硅胶柱， 紫外检测器，波长282nln。方法的检出限为0．1 ms／ks，方法的回收率在95．1％一100．0％。分析的准确度评 价采用了微量制备技术和反相液相色谱分离技术，并同时与AOAC方法进行比较验证，证明了该方法分析的 结果准确可靠。 关键词粮食麦角甾醇含量正相高效液相色谱法 粮食在生产或储藏过程中，可能会受到真菌的侵染；随着真菌侵染的程度的加深，粮食将逐步发生霉 变。霉变的食物不仅品质劣变，风味丧失，失去应有的价值，而且容易产生各种各样的毒素，如黄曲霉素、呕 吐毒素、玉米赤霉烯酮、他毒素、烟曲霉毒素、赭曲霉毒素。这些毒素被人或动物食用后将产生严重的危害， 如黄曲霉素可造成动物的肝脏损伤，有致癌活性，严重时可急性致死；玉米赤霉烯酮可造成动物的性早熟而 生育力下降；烟曲霉毒素可导致马不能正常入睡和原地转圈；赭曲霉毒素造成动物肾脏的损丧而频繁排尿； 呕吐毒素可造成动物不进食和进食后发生呕吐；即使是微量的毒素也可使动物的免疫机制受到抑制。因 此，真菌毒素的产生，不仅会给严重影响食物安全，还会造成生产成本的增加。准确地知道粮食、食品和饲 料是否受到真菌的侵染及侵染是否严重到霉变的程度，可以预测粮食、食品和饲料中存在毒素的风险程度， 对于准确地评价这些粮食、食品和饲料的食用或饲用安全程度有着十分重要的意义。 粮食、食品、饲料受真菌侵染的程度的定量分析通常采用微生物技术如平板计数法及侵染率(种子表面 受到真菌侵染的百分比)。这些方法费时，重现性差。平板计数法最大的缺陷在于可以反映能生长的霉菌 孢子的数量，而无法评价无孢子形成的菌丝体的数量。侵染率又难以找到平均样品，不能满足快速检测的 需要。 为避免这些缺陷，人们建立化学分析方法；这些方法从霉菌的化学组成人手，如几丁质含量分析和麦角 甾醇含量分析。 几丁质是真菌细胞壁的组成成分，化学成分为N一乙酰基一D一葡萄糖胺的聚合物，广泛存在于真菌菌 丝体和真菌孢子之中，也存在于昆虫外骨骼中，因此专一性较差。几丁质可通过酸、碱或酶水解后用比色法 分析，分析方法的缺陷是检测灵敏度低，受杂质的干扰，重现性差；几丁质也可以用氨基酸分析仪分析，但设 备昂贵。 麦角甾醇是真菌细胞膜的组成成分，对真菌细胞膜和其他细胞成分的形成起着重要的作用。麦角甾醇 也可以被某些细菌合成，但相对于真菌来说，数量甚微。植物甾醇主要为口一谷甾醇、豆甾醇及维生素D2；某 些禾木科植物含有低浓度的胆固醇；由于植物不能合成麦角甾醇或仅有痕量的麦角甾醇形成，因此，麦角甾 醇可以作为真菌的特有成分进行分析，其含量的多少反映了粮食受真菌侵染的程度，间接反映粮食的品质 状况；又由于麦角甾醇检测灵敏度高，检测快捷、简单，结果准确，其含量多少可以做为粮食食用安全的敏感 指标之一，如利用麦角甾醇的含量多少来评价粮食就仓干燥工艺的安全性。 麦角甾醇的分析方法有比色法，气相色谱法，红外光谱法，紫外光谱法及液相色谱法。由于液相色谱法 的快速、准确、重现性好而被各国专家普遍采用；如澳大利亚的乔治教授采用固相萃取技术及液相色谱分离 技术检测麦角甾醇的含量，以控制就仓干燥的工艺。考虑到我国的国情，要将麦角甾醇的检测技术在我国 中国粮油学会第五届学术年会论文选集 219 推广应用，必须具备检测成本低，检测快速，结果准确，方法通用性强等特点；因此，我们参照AOAC的麦角甾 醇的检测技术及其他资料介绍的甾族化合物检测技术，经比较研究之后，建立了一种快速、简单、准确、通用 的麦角甾醇的检测方法。 1 试验材料 1．1仪器 积分仪；进样针：25 InlTl，5 ttL及50止(瑞士Hamilton公司)；色谱柱：Spherisorb硅胶柱，250×4．0tun(Waters公