絮凝剂产生菌M-2的紫外诱变选育及发酵条件研究论文.pdfVIP

江苏农业科学 2013年第4l卷第2期 一 3o9一 万鹰听，师 磊，吴丽萍，等．絮凝剂产生菌M一2的紫外诱变选育及发酵条件研究[J]．江苏农业科学，2013,41(2)：309—311 絮凝剂产生菌M一2的紫外诱变选育及发酵条件研究 万鹰昕，师 磊，吴丽萍，唐培京 (北京联合大学应用文理学院，jE京 100083) 摘要：以絮凝剂产生菌 Galactomycessp．M一2为出发菌株 ，通过紫外诱变选育出一株产絮凝剂的高效菌株 UVM8，其絮凝活性可达92．8％。稳定性试验结果表明该菌株稳定性良好。研究发酵液的碳氮比、pH值等培养条件， 发现发酵液中碳源和氮源比为20g／L：2s／L、pH值为7或8时最有利于UVM8菌株产微生物絮凝剂。 关键词：生物絮凝剂 ；紫外诱变；絮凝活性；培养条件 中图分类号：TQ920．1 文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2013)02一o3o9—02 生物絮凝剂是一类由微生物或其分泌物产生的代谢产 t．3．2 菌悬液的制备 以5％接种量将菌液接种入灭菌后 物，它是通过微生物发酵、提取、精制而得到的一种具生物分 的液体培养基中，28℃下180r／rain摇床振荡培养 16h。把 解性和安全性的高效、无毒、无二次污染的水处理剂。对生物 菌种放入离心机中4000r／rain离心30rain，分离出菌种沉淀 絮凝剂的研究发现，起絮凝作用的是两性多聚电解质的多糖、 及培养液，把沉淀物(细胞)放入三角瓶内，加入灭菌蒸馏水 蛋白质、纤维素或 DNA等 -2。近些年来许多研究者认识到 和一定数量的玻璃珠，震荡使菌丝成片段，即为诱变所需悬 生物絮凝剂的开发潜力 ，并进行了大量研究工作，包括絮凝剂 浮液。 产生菌发酵条件、微生物絮凝剂组成成分、絮凝机理和应用的 1．3．3 紫外线诱变 取 10mL菌悬液于 10cm培养皿中，置 研究等 。 于磁力搅拌器上搅拌并用紫外线 (365nm)灯固定照射距离 在前人研究的基础上，笔者从活性污泥中筛选出一株具 为20cm照射一定时间。将诱变后的菌种适当稀释后涂平 有优 良絮凝能力的菌株—— o，r ssp．M一2，并研究了 板，3O℃静置培养24h，计数单菌落个数，计算存活率。存活 其絮凝特性 ，但该菌株在传代繁殖过程中受环境条件的 率=(紫外线处理活菌数／对照活菌数)×100％。 影响，出现了絮凝活性退化现象。为了使微生物的优 良性状 1．3．4 高絮凝活性诱变菌株的筛选 从分离平板上挑取生 持久延续下去，需要对菌种进行必要的复壮工作。本研究用 长状态良好、菌落直径相对较大的单菌落于斜面培养基，培养 紫外线诱变处理 Galactomycessp．M一2，从而提高其絮凝活 后接入培养基，筛选高絮凝活性菌株，经稳定性试验，得到高 性和产量，为生物絮凝剂的工业化生产奠定基础。 絮凝活性、稳定性 良好的目标菌株。 1．3．5 稳定性研究 将诱变筛选出的菌株连续6次转接，继 1 材料与方法 代培养后接入液体摇瓶培养，测定絮凝率，观测稳定性。 1．1 菌种 1．4 絮凝活性的测定 菌种为笔者从城市污水处理厂曝气池的活性污泥中分离 在 1000mL烧杯中加入 1000mL蒸馏水、4g高岭土、 筛选出的絮凝剂产生菌—— o，唧 sp．M一2(以下简称 0．2gCaC1，配制4s／L的高岭土悬浊液。用量筒量取一定量 M一2)。 的高岭土悬浊液置于烧杯 中，加 2％发酵液，调节 pH值至 1．2 培养基及培养方法