洗涤法结合硅珠法提取指甲垢DNA.pdfVIP

·短篇论著· 洗涤法结合硅珠法提取指甲垢DNA 伊海1．一，韩海军1，一，张玉红2，杨敏1”，贾东涛2，李士林1 (1．复旦大学生命科学学院，上海200433；2．南通市公安局物证鉴定所，江苏南通226007) 收集200枚刑事案件中受害人指 【摘要】目的考察洗涤法结合硅珠法提取指甲垢DNA的应用价值。方法 DNA；另有104枚检出受害人单一DNA。结论洗涤法结合硅珠法可应用于指甲垢DNA的提取。 【关键词】法医物证学；洗涤法；硅珠法；指甲垢；DNA提取 【中图分类号】DF／95．2 【文献标识码】B 【文章编号】1001-5728(2015)03-0291-02 doi：10．13618／j．issn．1001—5728．2015．03．018 560C 在杀人、抢劫、强奸等恶性刑事案件中，因受害人 600r／min振荡1h，再990C600r／min振荡8min， 与嫌疑人近距离接触或搏斗，指甲垢上可能留有对方 13 DNA，如果能够得到该异体DNA并进行分型，可为破管中，加入lmL吸附液，离心取上清液转再移至另一离 案提供关键证据。指甲垢检材一般采用二步擦拭转 移法或采用直接剪取法采集，并采用硅珠法提取 液；③漂洗液洗涤1次，70％乙醇洗涤3次，离心弃上 DNA。但一般认为二步擦拭法DNA检出率较低，而 剪取指甲后直接进行DNA提取则易受到自体DNA振荡15rain，离心取上清液用于PCR反应。 的干扰¨引。本文采用洗涤法转移指甲垢，硅珠法提 1．4复合扩增及分型检测 取DNA，可以提高异体DNA的检出率。 1材料与方法 体系进行复合扩增，扩增产物应用3030xl遗传分析仪 (美国AB公司)进行毛细管电泳，GeneMapperID—X软 1．1样本 件进行基因分型，混合样本分析按照文献[4]方法 采集本室受理的抢劫案件受害人7人(2男5 进行。 女)、强奸案件受害人13人(均为女性)的十指指甲 共200枚。上述20人在发案过程中均与加害方发生2结果 过搏斗，且均在报案后立即剪取指甲备检，同时提取 20人的血液样本作为对照。 对照样本比照分析，结果见表1。检出异体DNA的 1．2洗涤法转移指甲垢 指甲位置中拇指为5％、食指16％、中指15％、环指 将剪取的指甲放入1．5mL离心管中，加入300斗L 15％、小指8％。所有检出异体DNA的指甲均采集自 10％SLS(十二烷基肌氨酸钠)，置于恒温 TES，60wL 女性受害人，而抢劫案件中男性受害人的指甲垢中均 振荡器上，25℃300r／min保温30min，13000r／min离 未检出异体DNA。图1为某强奸案件中女性受害人 心3min，用干净镊子将指甲夹出。 指甲垢中检出的单一异体(男性)DNA，图2为该案受 1．3 DNA提取 害人血样DNA分型。 采用硅珠法提取DNA，试剂配置按照文献[3]， 表1 200枚指甲DNA分型检验结果 具体操作步骤：①向已去除指甲的离心管中加入