洗涤混合血小板的质量和部分体外功能的测定.pdfVIP

·375· ● 实验研究 ● 洗涤混合血小板的质量和部分体外功能的测定+ 赵凤绵1 粱晓虎1 张爱红1 王 毅1 陈红霞1 常 缨1 彭慧花1 张静1 赵丽华李 捷2 段云亭2 杨敬慈3 (1．河北省血液中心河北省石家庄05007l；2．河北省第四医院；3．河北省第二医院) 摘要：目的 细胞计数板测定白细胞残留量、用比浊法测定最大聚集率、用流式细胞计数仪测定CD4l和CD62p阳性表达率，并 测定该制品的pH值和血浆蛋白清除率。结果血小板含量≥2．5×1011／袋，白细胞的残留量达到106／袋，血浆蛋 白清除率≥98％，胶原蛋白诱导的最大聚集率90％，CD62p阳性表达率平均为19．52％。结论生理盐水洗涤混 合BP_PCs的质量符合单采血小板和洗涤红细胞的标准，具有较好的聚集功能，洗涤并未加强血小板的活化，可以用 于临床输注。 关键词：浓缩血小板 白膜层／混合体外功能，血小板血小板，混合 洗涤 R457．1 中图分类号：R331．1+43 文献标识码：A 文章编号：1004—549X(2006)05一0375一03 浓缩血小板(PCs)在临床治疗中发挥着重要作用，现有 的制备方法有：富血小板血浆法(PRP法)、白膜层法(BC 法)和单采血小板。笔者研究了混合白膜层浓缩血小板(混 合Bc-PCs)的制备和洗涤工艺，比较了混合BC-PCs洗涤前 后血小板计数、平均血小板体积(MPV)、聚集功能、CD62p中，即得1个治疗量洗涤混合BC_PCs。 阳性表达率、pH值、血浆蛋白清除率和自细胞、红细胞残余 1．4血小板计数、MPV、红细胞残余量的测定Sysn坨X． 量等指标，以此作为评估洗涤混合BC_PCs止血功能的替代820自动血细胞计数仪的检测原理属电极阻抗法，即在恒定 方法，为临床应用提供依据，报道如下。 直流电流作用下，悬浮在稀释液内的血细胞依次通过一个小 孔，通过瞬间电阻的变化来感知颗粒的大小和数量。用该计 1材料与方法 数仪的稀释样本检测模式(分全血法和稀释法)，在每袋洗涤 1．1血液来源随机选择符合《中华人民共和国献血法》健 制品和未洗涤制品制备后，立即测定其血小板含量、MPV、 红细胞残余量。由于浓缩血小板的浓度超出血细胞计数仪 康检查标准的2005年9～lo月的13名献血者捐献的全血， 400ml／(袋·人)。 测量范围，用稀释液把20肛l样本按1：4稀释后检测。 1．2仪器与试剂德国BeckmanJ6一HC大型离心机；泰尔 1．5 Nageotte计数法测定自细胞残余量取洗涤样本 茂(TERUM0)SC-201ATSCD无菌导管接口机、四联袋；日 本Sysmex_820自动血细胞计数仪；美国BD公司FACSCali— z 镜下计数1个满格子(5p1)上的白细胞，样本按llO稀释， bur流式细胞仪；普利生集团LBY·NJ2全自动四通道血小板 凝聚仪；显微镜和Nageotte白细胞计数板；生理盐水；美国 Beckman CouIter公司的CD41一FITC、CD62p-PE，同型对照胞实测值×稀释倍数×容量／100弘l。 mouse IgGlFITC、IgGlPE；血小板聚集诱导剂3种：ADP (普利生集团)、ADP和肾上腺素(武汉远大)、胶原蛋白(湖分别标记为对照管和测定管并分别加入同型对照mouse 南一格)。 IgGlFITC、IgGl 1．3混合BC-PCs制备及洗涤用四联袋采集的400ml新 鲜全血，保存在(22±2)℃，在4～6h内离心(19949， 13min)，分离出BC，在(22土2)℃条件下