SHIV-KB9感染中国源恒河猴后IFN-γ分泌性T细胞的反应分析.pdfVIP

第 45卷 第 1期 南 开 大 学 学 报 (自然科学版) V01．45 N_Ol 2012年 2月 ActaScientiarum NaturaliumUniversitatisNankaiensis Feb．2012 文章编号 ：0465—7942(2012)01—0065—04 SHIV—KB9感染 中国源恒河猴后 IFN— 分泌性 T细胞的反应分析 莎日娜 ，李 悦，袁玉华。，陈启民 (1．天津医学高等专科学校 ，天津 300222；2．南开大学 艾滋病研究中心，天津 300071； 3．天津市血液中心 ，天津 300110) 摘要 ：选取 ELISPOT方法测定 SHIV—KB9感染 中国源恒河猴后 PBMC 中病毒特异性 IFN—y分泌细胞 的 频数．通过对 4只动物的检测分析，发现记忆性T细胞分泌 IFN一7的能力与血浆中病毒载量呈负相关．但与印度 源恒河猴相 比，总体反应强度较弱，可能与中国源恒河猴遗传背景有关 ．由此为 sHIV／中国源恒河猴模型的细胞 免疫背景提供数据支持，也为今后利用此模型进行 AIDS发病机制研究、药物筛选和疫苗评价奠定一定的基础． 关键词 ：人猿嵌合免疫缺陷病毒 ；中国源恒河猴 ；模型 ；细胞免疫 ；酶联免疫斑点法 中图分类号 ：Q78 文献标识码 ：A 0 引 言 非人灵长类动物的AIDS感染模型是研究AIDS发病机制、药物筛选和疫苗评价的理想模型之一[1]． 面对众多艾滋病候选疫苗的筛选，如何系统合理的评价疫苗引起的免疫应答反应是 目前疫苗学家们关注 的重点．而病毒感染引起的宿主免疫反应 ，大致可分为细胞免疫、体液免疫和天然免疫．其 中，细胞免疫被 证 明在抗病毒反应 中起着重要 的作用_2]．目前 ，常用于细胞免疫评价 的方法，包括酶联免疫斑 点法 (ELISPOT)[3--4]，胞内因子染色法 (ICS) 和 MHC一四聚体多肽染色法 (Tetramer)_6]． 目前 ，SHIV／恒河猴模型是 AIDS研究中常用的动物模型 ，得到了广泛的关注和应用 ．世界上许多 国家以印度源恒河猴为生物医学研究的实验动物 ，但随着其资源的13益减少，许多研究者开始使用中国源 恒河猴进行科学研究．但前期研究显示，由于中国恒河猴和印度恒河猴在遗传背景上的不同导致其病原体 感染后的反应存在差异 ．因此 ，有必要对我国SHIV／恒河猴感染模型的免疫反应特征进行研究．本文选 取了较为成熟的ELISPOT方法 ，测定 B亚型标准株 SHIV—KB9感染中国源恒河猴后 PBMC中病毒特异 性 IFN—y分泌细胞的频数．由此为 SHIV／中国源恒河猴模型的细胞免疫背景提供数据支持，借此完善该 模型，并为今后利用此模型进行 AIDS发病机制研究、药物筛选和疫苗评价奠定一定的基础． 1 材料和方法 1．1 实验材料 1．1．1 毒株 ：攻毒株为人猴嵌合免疫缺陷病毒SHIV—KB9，由中国疾病预防控制中心性艾中心病免室提 供． 1．1．2 动物：本实验使用 4只中国源恒河猴 ，由中国医学科学院医学生物研究所提供 ，实验前 已排除 SIV，SRV及STLV一1的感染． 1．1．3 多肽及其配制 ：SIVmac239Gag(cat#6204complete125peptide)和 HIV一1conBEnv (cat# 9480complete211peptide)基因全长的多肽 由NIH惠赠．每瓶单肽含量为 1mg，加入 5O LDMSO和 收稿 日期 ：2011-06—16 基金项 目：天津市高等学校科技发展基金 作者简介 ：莎 日娜 (1963一)，女，吉林前郭旗人 ，副教授 ，主要从事分子病毒学研究． 通讯作者 ：陈启民(1944一)，男，山东菏泽人 ，教授，博士生导师，主要从事分子病毒学研究．email：Chenqimin@nankai． edu．cn ·66 · 南 开 大 学 学 报 (自然科学版) 第 45卷 450 L1640培养基原液配