芳香化酶抑制剂对暗纹东方鲀CYP19A、DMRT1基因表达及性腺分化的影响论文.pdfVIP

中国水产科学 2013年 1月，20(1)：68—74 JournalofFisherySciencesofChina 研 究论文 DoI：10．3724／SP．J．1118．2013．00068 芳香化酶抑制剂对暗纹东方纯 CYP19A、DMRT1基因表达及性腺分 化的影响 黄波 ，杨小玉2，戴奇 ，汪奇 ，云丹 ，周忠 良 1．华东师范大学 生命科学学院，上海 200062； 2．江苏中润农业发展有限公司，江苏 南通 226634 摘要：采用组织学和分子生物学方法，研究了投喂芳香化酶抑制剂来曲唑(LE)后暗纹东方囟屯(Takfiuguobscures)初 孵仔鱼 CYP19A、DMRT1基因表达以及性腺的组织学变化，以期进一步了解P450芳香化酶(P450arom)在鱼类早期 性别分化过程中的作用。RT．PCR结果显示，对照组样品 CYP19A和 DMRT1表达显示性二态，雌性表达 CYP19A 基因，雄性表达 DMRT1基因。LE处理组在性别分化期间，雄性样 品单一表达 DMRT1，雌性样品则同时表达 CYP19A和DMRT1。qRT．PCR结果显示：LE处理组雌性仔鱼 CYPI9A基因表达被显著抑；虽然在仔鱼出膜后 22 d(dph)的表达水平高于9dph，但仅为同 日对照组的2．1l％。LE处理组雌性样品22dph时DMRT1基因表达量上调， 至 150dph时达对照组雄性水平 。55dph的性腺组织学结果表明，LE处理可导致暗纹东方纯稚鱼原始卵巢退化，并 向功能性精巢发育。150dph的LE处理组性腺均为精巢，并与对照组精巢发育同步。结论认为，暗纹东方纯性腺 分化期间P450arom是卵巢形成和维持发育所必须的，抑制P450arom活性可导致雌性暗纹东方纯发生雄性化逆转。 关键词：暗纹东方鱼屯；性别分化；芳香化酶抑制剂(AI)；CYP19A；DMRT1 中图分类号：$917 文献标志码：A 文章编号：1005—8737一(2013)01—0068—07 P450芳香化酶(P450arom)是人及脊椎动物控 pes)ZJO~,性雄性化6【J。由于相关的研究报道不多， 制睾酮转化为雌激素的最关键酶，催化睾酮和雄 尤其是实验涉及的鱼类种类较少，目前对研究报 烯二酮转化为雌酮和雌二醇。而雌激素在鱼类卵 道中出现矛盾的结果还未能作出合理解释。进一 巢分化、发育和雌性性别特征维持中起重要作用。 步的研究不仅可增加对 P450arom 在鱼类早期性 为此 P450arom 在雌鱼性别分化中的作用受到人 别分化中作用机制的了解，同时对养殖鱼类的单 们的关注 1【]。实验室应用P450arom抑制剂(AI)诱 性育种也具有理论指导意义。 导鱼类雄性化的研究已有报道，AI处理不仅可以 暗纹东方纯(Takifuguobscures)俗称河纯，是 使石斑鱼fEpinephelusmerra)等雌性先熟的雌雄 长江中下游水域中的名贵鱼种。长期以来，由于 同体鱼类提前向雄性转化L2J，也可导致罗非鱼 野生河鱼屯血液、肝、卵巢等器官组织含有剧毒而 (Niletilapia) 、红鳍东方纯(Takifugurubripes)J、 影响食用。随着暗纹东方鲍人工养殖技术不断成 斑马鱼(Daniorerio1J等雌雄异体鱼类发生雄性 熟[，毒素得到有效控制，养殖规模不断扩大， 化逆转。但也有与此相反结果的报告，如AI和雌 逐渐成为重要的特种水产品。雄性个体毒素含量 激素受体拮抗剂未能诱导 日本青 (Oryziaslati— 远低于雌性，因此河纯单雄性养殖将是安全生产 收稿 日期：2012—02—29；修订 日期：2012—04—25． 基金项 目：上海 自然科学基金(08ZR1407300)． 作者简介：黄波(1986一)，男，硕士，主要从事水生动物毒理学研究，E—mail：bobisma86@163．tom 通信作者：周忠 良，男，副教授．E—maihzhouzl@mail．ecnu．edu．cn 第 1期 黄波等：芳香化酶抑制剂对暗纹东方纯 CYP19A、DMRT1基因表达及性腺分化的影响 69 的重要途径之一。研究发现，暗纹东方