花椰菜种质材料幼苗生长对低磷胁迫的响应.PDFVIP

花椰菜种质材料幼苗生长对低磷胁迫的响应 摘要：以15 份花椰菜种质为材料，研究花椰菜幼苗对低磷胁迫的响应。测定了不同磷浓度条件下花椰菜萌发生长7 天时的 地上部鲜重、花青素含量、根部和地上部全磷含量和无机磷含量。结果表明，花椰菜种质受低磷胁迫表现不同程度的地上部 鲜重降低、花青素积累增多、全磷含量降低和无机磷含量降低。本研究为进一步评价鉴定耐低磷花椰菜种质提供了依据。 关键词：花椰菜；低磷胁迫；花青素；全磷；无机磷 磷是植物生长发育所需的必要元素，施用磷肥是保障作物产量的必要措施，但是土壤中，磷酸盐会被 [1] 粘土和有机质迅速吸附、被阳离子沉淀或被土壤微生物转化为无法直接利用的有机磷 。磷肥的使用在全 [2] 球范围内迅速增加，如果人们继续以当前水平施用磷肥，全球磷矿将在50年内被耗尽 。因此，提高植物 的磷吸收效率和磷利用效率是保证粮食安全和保护土壤、水资源的当务之急。 花椰菜（Brassica oleracea L. var. botrytis L. ）是一种重要的蔬菜作物，其营养丰富，又富含具有强抗 [3] 癌活性的酶，深受人们喜爱。磷对花椰菜的叶分化生长、花芽分化和花球膨大有显著作用 。建立起有效 的磷高效花椰菜筛选评价体系，筛选磷高效花椰菜种质资源，是选育磷高效花椰菜品种的必要途径，而在 幼苗期进行初步筛选可以大大节约时间空间及其他资源。本文试图通过研究低磷胁迫对 15 种花椰菜种质 材料幼苗生长的影响，为花椰菜耐低磷种质的筛选评价提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 材料 供试材料为15 份花椰菜高代自交系，均由本校实验室提供。 1.2 试验方法 1.2.1 种子消毒与萌发生长 将花椰菜种子用次氯酸钠溶液[0.5% （v/v ）NaClO+0.01% （v/v ）TritonX-100]消毒8 min 后，在超净工 作台中用无菌蒸馏水清洗5 次，于4 ℃冰箱放置2 d 后接种于相应培养基，培养皿竖直放置于培养皿架， 于温室 （23℃，光周期 14 hr light/10 hr dark ，光强 3000 lx ）生长7d 。 1.2.2 低磷胁迫处理 种子于不同磷浓度培养基生长，对照为 1/2MS，实际KH PO 浓度约 625 μM ，低磷培养基为 1/2MS 2 4 减去KH PO ，培养基中仅有来自琼脂粉的磷，折合后浓度约14 μM 。 2 4 1.2.3 测定方法 种子接种7 天后测定形态和生理指标。 （1）地上部鲜重：用剪刀沿根茎分界剪下，茎叶合属地上部，吸干表层水分后称重。 （2 ）花青素含量测定：每皿4 棵左右幼苗取地上部称取鲜重后浸没于5 ml 花青素提取液 （1 ml 浓盐 酸+18 ml 异丙醇+81 ml ddH O ），浸提过夜。次日取浸提液测定OD535 和OD650 。花青素含量= （A535-2 2 ×A650)/FW 。 （3 ）全磷含量测定：每份样10～20 棵幼苗，用剪刀沿根茎分界剪下，地上部和根部分别于80℃烘箱 放置过夜，次日称取干重，转移入坩埚中，310℃ 1 hr，580℃ 6 hr 灰化。灰化的样品用 1 ml 1 mol/L 盐 酸溶解，钒钼酸铵显色法测定OD410 。 （4 ）无机磷含量测定：幼苗用剪刀剪下根和冠 （茎尖生长点以上），根部用去离子水洗去粘附的培养 基，冠部轻吸去表面水分，液氮速冻。向每个1.5ml 离心管中加入100μl 磷提取液[1 M Tris-HCl （pH8.0 ）5 ml+0.5 M EDTA （pH8.0 ）1 ml+NaCl 2.92