饲料分析与检测实验：饲料中霉菌的检验 免费.docVIP

实验十一 饲料中霉菌的检验 【学习目标】 掌握饲料原料及配合饲料霉菌的检验方法，并能用该方法检验各类饲料霉菌。 一、检验方法 （一）霉菌的检测程序 霉菌检验程序见图1-4。 图3-2 饲料中霉菌检验 （二）操作步骤 1.采样 采样时注意样品的代表性和避免采样时的污染，准备好灭菌容器(纸袋或广口瓶)及采样工具(金属勺、刀等)，样品采集后应尽快检测，否则置样品于低温干燥处。样品的采集按随机的原则分层、点、面在不同的方位采取，充分混匀后按四分法取500.0g送检。 2.以无菌操作称取样品25.0g(或25.0ml)，置含有250.0ml 灭菌稀释液的三角瓶中，放在振荡器上振荡30.0min，即为1﹕10的混悬稀释液。 3.取无菌吸管吸取1﹕10混悬稀释液10.0ml，注入具塞玻璃试管中，置混合器充分混合3.0min；或注入试管中，另取一支1.0ml灭菌刻度吸管加橡胶乳头，反复吹吸大约50次，使霉菌孢子充分混匀。 4.取3制备的1﹕10混悬稀释液1.0ml，注入含有9.0ml灭菌稀释液试管中，另取一支吸管吹吸50次，此液为1﹕100稀释液。 5.按上述操作做10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1.0ml灭菌刻度吸管，根据样品污染程度，估计选择3个合适的稀释度，分别注入10倍稀释液的同时，吸取1.0ml稀释液于灭菌培养皿中，每个稀释度做 2～3个培养皿，然后注入凉至约45.0℃左右的琼脂于培养皿中，充分混合，琼脂凝固后，倒置于25.0～28.0℃培养箱中，培养3天后开始观察，应培养观察1周。 6.计算 通常选择菌落数在30～100个之间的培养皿进行计数，同稀释度的2～3个培养皿菌落平均数乘以稀释倍数，即以每g(或ml) 检测样品中含霉菌数。 二、检验方法评价 该检测方法对无菌操作要求严格，在检测过程中一定要保证吸管不被污染，而且吸取液体的枪头一定不能重复使用，该方法在操作规范的前提下能得出准确的结果。 根据霉菌的生理特性，选择适宜于霉菌生长繁殖而不适宜细菌生长繁殖的培养基，采用平面计数方法测定霉菌。 谷物饲料 块状饲料 粉状饲料 无菌稀释液10倍稀释振荡10.0min 做成几个适当稀释倍数的稀释液 选择三个适当稀释度，各以1.0ml加入无菌培养皿 每皿加入适量培养基 25—28℃培养一周 报告结果 样品 磨碎 菌落计数