凋亡抑制基因Survivin在胰腺癌中的表达及其与Bcl-2、p53相关性的研究.pdfVIP

中文摘要 羟lj 磊 《缨施凋亡对予多缨脆生物体酌发育和稳态的维持是至关重要 的，缩胞璃亡异常在许多人体恶性肿瘤的发病学上占有十分重要 of 的地位。羯亡撵镯蛋白(inhibitor apoptosisprotein，IAP)家族是 重要的弱亡捧锈荆。Survivin燕IAP家族的新成员，保留了IAP分 IAP 子结构孛最为关键的BIR：(baculovirus repeat)功能区，能直接 摔制嚣亡途径的终束效应蛋自Caspase一3、7，是迄今为止发现的 最强的凋亡揶制因子。 Survivin基因位于染色体17q25，表达产物是一种胞浆蛋白。 Survivin蛋白表达予胚胎和发育的胎』乙组织，不觅子终末分化的成 入组缀(子宫内膜、胸腺和胎盘除外)，但在几乎所有恶性肿瘤组 织中均有广泛的表达。同时，Survivin的表达还舆有细胞周期依赖 性，在G，期不表达，而在G：／M期高表达，因而与细胞增殖密切相 关。许多证据提示Survivin在肿瘤发病学上有重要的意义。Bcl一 2和p53是迄今为止研究得最深入、广泛的肿瘤相关基因，与细胞 凋亡密切相关。、士 胰腺癌是较常觅的消化系统恶性肿瘤之一，早期诊断困难，手 术切除率低。目前胰腺癌的发病机制仍不十分清楚，有关Survivin 基因与胰腺癌的相关报道甚少，其与Bcl-2、p53表达的关系尚未 明了。为此，我们检测Survivin在胰腺癌中的表达及其与Bcl一2、 p53基因表达的相关性，并探讨其意义，从而为胰腺癌的诊断和治 疗提供一种新的思路。 f材料和方法 ＼ j 1。研究瓣象 选择峻床病理资料齐全的中豳医科大学附属一院、二院普外 科警拳切除、病理证实为胰腺癞的蝼块标本50侧，其中男26铡， 女24铡；年龄35—77岁，平均(57。7-+7．4)岁；组织学分化：高分 化18铡，中分化20铡，低分化12铡；鼹部漤怨绪转移：有26例， 燕24饲；掇摄1997年爨际娩瘿滋会(UICC)制定的TNM分期标 准遗符l涟糜分期：l期14例，Ⅱ期12铡，疆期14侧，Ⅳ期lO侧。 另歌5铡慢性胰腺炎秘12铡燕常胰腺蜡块标本佟为对照。 2，主要泼剂 羊抗人Survivin单竟隆抗体为美邂SantaCruz公翅产照，小鼠 撼人Bel一2单壳隆抗体及p53单克隆抗体均为福州市避毅生物 技零舞发公溺产品。 3。受疫缒织纯学染色(SP法) 将蝼块铡成5pan厚瓣切片。选取一张进行嚣规HE染色，确 定缀熬学诊断及分纯稷度。检测Survivin、Bel一2、p53在胰躲组织 孛懿表达，步骤鲡下：荔蜡切片鬻热脱燃至水；抗愿修复：0．01M PH6．0鞠橼酸盐缓净液嘉瀑蒜匿1．5分钟；分别攥3％％O。翻非 兔痰盔游辍凝巍潦健过氧纯壤酶活性并封耀嚣特异性绩会位点； 漆龆一撬《Suxvlvin1：200耩释)，4℃越发；生赞素标记的二挽 37℃赙誉30分铮；SP复合物37≮孵弯30分铮；DAB盟色；苏本索 复染3分锋；盐酸溪粮分佬2—3秒；脱零、透鼹、孛姓辩皴封片。 穗翔麓链懿鞋艨癌甥冀髂麓性对照，PBS缓冲淡代替～撬俸鞠性 辩慧。 4．结果鼗定： Survivin纛Bel-2驽裘达在缨稳浆，拶3表达手缝魄棱，分别 ·2· 以细胞浆或细胞核染为淡黄色歪棕黄色，染色强度明显高于背景 者为阳性；无黄色染色且显色强度与背景炙明显差别者为阴性。 5．统计学分析：采用x2检骏，P0．05被视为显著性标准。 研究结果 l。Survivin蛋自在胰腺癌孛的表达： Survivin蛋白表达于肿瘤细胞胞浆中，在胰腺癌组织中表达阳 性率为76．O％(38／50)，在慢性胰腺炎及正常胰腺缰级中不表达， 与胰腺癌组织摆比差异显著(P0．01)。 2