猪附红细胞体的体外连续培养 - 畜牧兽医学报.pdf

畜牧兽医学报 ， （）： ２００８３９８ １１４２１１４６ 　 犃犮狋犪犞犲狋犲狉犻狀犪狉犻犪犲狋犣狅狅狋犲犮犺狀犻犮犪犛犻狀犻犮犪 猪附红细胞体的体外连续培养 ， １ ３ １ １ １ １ １ １ ２ 李晓云 ，贾杏林 ，石德时 ，肖运才 ，胡思顺 ，刘 梅 ，袁宗辉 ，毕丁仁 　 （ 华中农业大学动物医学院，武汉 ； 农业微生物学国家重点实验室，武汉 ； １． ４３００７０ ２． ４３００７０ ３．湖南农业大学动物医学院，长沙 ４１０１２８） 摘 要：临床疑似猪附红细胞体病猪红细胞，经 染色镜检及 扩增，证实感染猪附红细胞体（ ）。 Ｇｉｅｍｓａ ＰＣＲ 犕．狊狌犻狊 　 扩增片段（ ）与 已知序列（ ）同源性达 。经预试验对红细胞接种量、血清添加量、 ＰＣＲ ７８１ｂ 犕．狊狌犻狊 ＡＪ５０４９９９ ９９．４％ ｐ ｐＨ等条件优化后，选用添加新生牛血清、酵母浸出液、葡萄糖等成分的ＰＰＬＯ肉汤，将染虫红细胞接种到细胞培养 板上，置于 、含 的培养箱培养，定期更换培养液，约 后红细胞溶血变为带虫血影（ ）。除首次 ３７℃ ５％ＣＯ２ ７２ｈ Ｇｈｏｓｔ 接种外不添加任何红细胞，连续培养达 ２８０ｄ以上，染虫率维持近 １００％。对培养的带虫血影进行了光镜及扫描电 镜观察、 鉴定、感染阴性红细胞试验、抗生素敏感性试验，证实与接种物为同一病原，并保持有感染阴性红细胞 ＰＣＲ 的能力。 关键词：猪附红细胞体； 肉汤；体外培养；血影 ＰＰＬＯ 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｓ８５２．６２ Ａ ０３６６６９６４２００８０８１１４２０５ 　　　　 　　　　 犆狅狀狋犻狀狌狅狌狊犻狀狏犻狋狉狅犆狌犾狋犻狏犪狋犻狅狀狅犳犕 犮狅犾犪狊犿犪狊狌犻狊 狔 狆 １ ３ １ １ １ ， ， ， ， ， ＬＩＸｉａｏｕｎ ＪＩＡＸｉｎｌｉｎ ＳＨＩＤｅｓｈｉＸＩＡＯＹｕｎｃａｉＨＵＳｉｓｈｕｎ ｙ ｇ ， １ １ １ ２ ， ， ＬＩＵＭｅｉＹＵＡＮＺｏｎｈｕｉ ＢＩＤｉｎｒｅｎ