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粮油检测与加工 影响液相色谱检测麦角甾醇结果的因素 ·41· 影响液相色谱检测麦角甾醇结果的因素 刘云花 李辉章 姜 涛 盛 强 熊升伟 胡建蓉 杨 娟 (中储粮成都粮食储藏科学研究所 610031) 麦角甾醇 (ergosterol，也称麦角固醇)，化学名 经脱水、浓缩和硅胶柱分离后，用高效液相色谱仪紫 为 (3J3，22E)一麦角一5，7，22一三烯一3一醇，是一 外检测器在 282am处检测，外标法定量。 种重要的植物甾醇，可以增强人体抵抗疾病的能力。 2 影 响 检 测 结 果 准 确 度 的 因素 麦角甾醇经紫外线照射会发生一系列变化，是重要 2．1 取样的均匀性 的维生素D源。它本身是微生物细胞膜的重要组 成部分，对细胞膜的完整性，膜结合酶的活性，膜的 由于真菌生长的不均匀性，要取到有代表性的 原始样品。一般分两种情况处理：一是实仓分层分 流动性，细胞活力以及细胞物质运输等起着重要作 点取样，取来的样品尽量混匀后分出2 作为原始 用。粮食中的麦角甾醇来源于侵染粮食的真菌(孢 样品；二是实验室研究样品，先要尽可能混匀后，再 子或菌丝体)，以游离麦角甾醇和麦角甾醇磷酸酯的 形式存在，是真菌细胞膜的组成成分之一，维系着真 取2kg作为原始样品。 2．2 样品制备 菌细胞的正常代谢。目前，真菌中麦角甾醇的分析 方法主要有薄层色谱法[、气相色谱法嘲和高效液 用四分法从原始样品中分出500g用于样品制 相色谱法[3卅]。薄层色谱虽然能够分离，但定量不 备，将这 500g样品全部粉碎后再混匀。样品越细， 菌丝在粉末中的分布越均匀，检测结果的重复性越 准确，步骤繁杂，且耗时过多；用气相色谱法通过硅 好，：样品制备时要求采用0．5mm筛片。通常，用 烷衍生化进行测定，不但方法比较繁琐且存在拖尾 Foss1093旋风磨(O．5mm圆孔筛)就可以保证样品 后峰型展宽等问题；而高效液相色谱法简便、快速、 重现好，故此大多数物质中的麦角甾醇的含量测定 有足够的细度；过分要求细度在实际工作难以实现， 也没必要。例如，我们给出关于 Foss1093旋风磨 多采用此法。本文对使用高效液相色谱检测麦角甾 (O．5lnln圆孔筛)制样的细度情况有一些参考数 醇方法中影响检测结果的因素及其注意事项进行了 系统的讨论。 据：籼米磨一次，可使 90 的粉样过 100目标准铜 丝筛；粳米磨三次，可使 90 的粉样过 100目标准 铜丝筛；小麦磨三次，可使 94 的粉样过 i00目标 准铜丝筛；玉米磨三次，可使 90 的粉样过 100目 标准铜丝筛。 2．3 称量