丹参DNA提取方法比较.pdfVIP

第27卷第1期 中国野生植物资源 V01．27 No．1 2008年2月 Chinese矸 d尸 nt Resources Feb．2008 丹参DNA提取方法比较 宋振巧，王明明，王建华’，王洪刚 (山东农业大学农学院，山东泰安271018) 摘 要 为从富含多糖、酚类物质的丹参幼叶中提取高质量的核总DNA，比较了4种DNA提取方法对丹参叶片的 提取效果，结果表明：改良CTAB法提取的DNA溶液颜色为无色透明、A260／A230为2．137、A260／A280为1．816值 最好，是提取丹参基因组DNA的有效方法。 关键词 丹参；SDS；CTAB法 中图分类号：Q523 文献标识码：A 文章编号：1006-9690(2008)O1—0054—04 Comparison of Genomic DNA Extraction Methods for．S ia miltiorrhiza Song Zhenqiao，Wang Mingming，Wang Jianhua，Wang Honggang (Agronomy college，Shandong Agricultural University，Taian 271018，China) Abstract：To get high—-quality DNA from young leaves of Salvia miltiorrhiza which consist of polysaccha·- rides and phenols，four different DNA—extracting methods were compared in this paper．The results showed that：The improved CTAB was the best method since the DNA extracted by it had the best color of liquor，A260／A230 ratio and A260／A280 ratio． Key words：Salvia miltiorrhiza；ISSR；orthogonal design；reaction system 丹参是我国传统的大宗药材，是著名活血化瘀 ITS片段的遗传多样性，并分析了该片段在丹参药 药，现代药理研究表明丹参对心血管系统的作用十 材DNA分子鉴别和鼠尾草属(Salvia)植物系统学 分显著，已成为治疗冠心病最常用的中药之一。 研究中的意义。高质量的DNA是获取可靠分子标 《中华人民共和国药典》规定，丹参为唇形科(Labia· 记结果的前提。但丹参叶片含有较高的多糖、酚类 tae)植物丹参(Salvia mihiorrhiza Bge．)干燥根及根 等次生代谢产物，DNA的提取和纯化相对复杂。虽 茎。丹参的生态适应强，在我国广泛分布，其中河 然已有对丹参进行分子标记研究的若干报道(郭宝 南、山东、四川、山西、陕西、湖北、安徽等省丹参产量 林等，2002；汪红等，2005)，但关于详细研究丹参 较大。 DNA提取方法的报道较少。不同实验室所用仪器、 随着分子生物学的发展，多种生物技术逐渐在 试剂不同，相同物种的DNA提取方法(吴丽圆， 丹参的遗传多样性分析、资源评价等方面得到应用。 2004；申丹，2005)不尽相同。因此，本文拟研究获得 如李晓燕等(2004)、郭宝林等(2002)、张兴国等 提取高质量丹参基因组DNA质量的方法，为进一步 (2002)利用RAPD标记技术对丹参的种质材料进 用ISSR技术评价丹参资源奠定基础。 行了遗传多样性分析；汪红等(2005)研究了丹参