三聚氰胺免疫亲和柱的制备和测试 - 食品与生物技术学报.pdf

研究论文研究论文 徐 丽广 ，等 ： 三聚氰胺免疫亲和柱的制备和测试 三聚氰胺免疫亲和柱的制备和测试 徐 丽广 ， 刘丽强 ， 匡 华， 彭池方 ， 宋珊珊 ， 欧阳华 ， 胥传来 （江南大学食品学院，江苏无锡 214122 ） 摘要： 制备高容量的三聚氰胺免疫亲和层析柱 ，以识别三聚氰胺的单克隆抗体为配体 ，采用硅烷 化方法 ，对抗体进行包埋 ，装填小柱 。 采用三聚氰胺系列标准溶液进行富集试验 ，通过紫外光谱 （三聚氰胺最大紫外吸收波长 240 nm ） 和 液相色谱－质谱测试流出液和洗脱液中三聚氰胺的浓 度 ，确定了免疫亲和柱的柱容量为 16.47 μg 。 试验中对亲和小柱的润洗溶液 、上样溶液 、洗脱溶 液和再生溶液进行了优化 ，结果表明 ，该免疫亲和层析柱的富集效 率可达 66 倍 。 以回收率 高于 60％计 ，该柱的再生 次数至少为 5 次 。 关键词： 三聚氰胺 ；免疫亲和层析柱 ；抗体 ；富集 中图分类号： 文献标志码： 文章编号： — （ ） — — TS 207.3 A 1673 1689 2013 07 0749 05 Preparation and Evaluation of Melamine Immunoaffinity Column XU Li-guang ， LIU Li-qiang ， KUANG Hua ， PENG Chi-fang ， ， ， SONG Shan-shan OUYANG Hua XU Chuan-lai （ ， ， ， ） School of Food Science and Technology Jiangnan University Wuxi 214122 China ： immunoaffinity column （ ） or melamine with high column capacity was prepared Abstract An IAC f ， in this study. Based on a monoclonal antibody against melamine a silanization approach was used to coat antibody as ligands. The resulting products were packed in columns. Series concentration of melamine was loaded on the columns to evaluate columns performances. UV spectrum and liquid chromatography tandem mass spectrum （LC-MS ） were used to test the melamine level of elu