大肠杆菌磷酸果糖激酶基因在极端嗜酸性氧化硫硫 - researchgate.pdf

See discussions, stats, and author profiles for this publication at: /publication/7485968 [Expression of phosphofructokinase gene from Escherichia coli K-12 in obligately autotrophic bacterium... Article in A TA MI ROBIOLOGI A SINI A · November 2003 Source: PubMed ITATION READS 1 54 5 authors, including: Jianqun Lin Xiangmei Liu Shandong University Shandong University 38 PUBLI ATIONS 218 ITATIONS 22 PUBLI ATIONS 295 ITATIONS SEE PROFILE SEE PROFILE All content following this page was uploaded by Xiangmei Liu on 16 October 2014. The user has requested enhancement of the downloaded file. 43 卷 　5 期 微 生 物 学 报 Vol. 43 No. 5 2003 年 10 月 Acta Microbiologica Sinica October 　2003 大肠杆菌磷酸果糖激酶基因在极端嗜酸性 氧化硫硫杆菌中的表达 田克立 　林建群 　刘相梅 　刘 　缨 　张长铠 ( 山东大学生命科学院 微生物技术国家重点实验室　济南　250100) ( ) 摘 　要 :构建了含大肠杆菌磷酸果糖激酶 EC 2. 7. 1. 11 基因 pfkA 的重组质粒pSDK1 ,利用大 肠杆菌 pfk 缺陷株筛选含目的基因的重组质粒 ,通过接合转移的方式将其导入氧化硫硫杆菌 TtZ2 中 ,接合转移频率达 26 ×10- 6 。重组质粒在 TtZ2 中有较好的稳定性 ,在无选择压力条 ( ) 件下传代 50 次基本保持稳定 重组质粒保留 68 % 以上 。酶活性测定、SDSPAGE 及 RTPCR 结果表明 ,pfkA 基因在氧化硫硫杆菌中得到表达 ,但其表达水平低于大肠杆菌。葡萄糖可促 进含 pSDK1 的氧化硫硫杆菌 TtZ2 的生长 ,而对照菌株的生长则未受明显影响 ,说明重组菌 可部分利用葡萄糖作为碳源生长。 关键词 :氧化硫硫杆菌 ,磷酸果糖激酶 ,接合转移 中图分类号:Q786 　　文献标识码 :A 　　文章编号 (2003) ( ) 氧化硫硫杆菌 Acidithiobacillus thiooxidans 是极端嗜酸性专性化能无机营养菌 ,通过 氧化硫或还原态硫化物获得能量和还原力 , 固定 CO2 获得细胞碳。在农业、冶金、煤和石 油的脱硫以及废水处理等方面具有重要作用。酶学分析表明[1 ]