不同品系西蜂DNA随机扩增多态（RAPD）及遗传分化分析.pdfVIP

摘 要 本研究根据RAPD技术的分析原理和方法，选用了26种随机扩增引物对我省 从国内外新近引进的一些优良品系的西方蜜蜂的基因组DNA进行RAPD．PCR分 析，并依据扩增所获得的图谱，选用与此有关程序计算并分析了不同基因型间片 段共享度(F)、遗传距离(D)、品系遗传多样性指数(Ho)及遗传分化指数 (Gst)等。其目的在于了解我省本地西蜂品系与引进的国内外的优良西蜂品系 在各个个体的遗传变异及其在分子水平上的差异，为进一步搞好我省优良品种培 育和推广工作，以此提高我省西方蜜蜂的优良品质以及蜂产品的质量和数量，在 分子水平上提供一定的理论依据。 通过研究分析，结果表明：从26种随机引物在进行PCR扩增结果中，可以 物在对不同品系的西方蜜蜂的RAPD-PCR分析的图谱中出现了很明显的特异性谱 带，这些随机引物可以作为不同品系的西方蜜蜂区分的依据；不同品系的西方蜜 蜂的遗传多样性存在着一定差异，但总体上各品系西蜂的遗传多样性都不很高， 其遗传多样性水平或遗传变异主要是由于品系间的基因交流等因素造成，而品系 内的因素影响相对较小；所研究的这些品系西蜂的变异在群体间不高，其遗传分 化指数显示只有47．51％的变异存在于群体之间，其中的6大种群的平均遗传分化 体的遗传分化相对更低；通过遗传距离指数和构建的聚类图分析看出所研究的18 个不同西蜂品系的平均遗传距离为0．2093，也显示出同一起源的品系阆的遗传距 离比较小，两种起源不同的品系间的平均遗传距离较大，聚类图可以分为两大支， 一支代表了14个种群的浆蜂、本地意蜂、喀蜂、喀意杂交蜂以及德喀杂交蜂品系， 另一支为含有4个群体的高加索蜂品系，同时表明了不同起源西蜂品系间的遗传 差异较大。对本地的意蜂分析可知，各群体阃存在着一定程度遗传分化现象，其 遗传变异也主要是由各品系间的基因交流得到，但各个地方群体间存在着较大的 遗传差异，即说明了我省意蜂广泛存在着多种类型的能表现不同生产性能的基因， 只要能做好品种选育以及各群体的选配等相关工作。蕴藏的高产优质基因将会有 很大扩展空间和表现的机会。 本研究对不同西蜂品系遗传特性等从分子水平上进行了探讨，为我省今后的 蜜蜂育种工作以及如何保护和开发地方优良品系，提供了一些极有价值的理论依 据。 关键词：西方蜜蜂 不同品系RAPD—PCR遗传距离遗传多样性 遗传分化 聚类分析 1．前 言 四川省是祖国西南的一个内陆大省，地域广，小气候复杂，蜜粉源植物十分丰富， 是养蜂的天然理想场所，一直以来就是我们国家的几个养蜂大省之一。现有蜂群数已达 多万美元。 然而与之相对应的是，我省在对蜜蜂育种和基础性研究相当落后。过去，四川省仅 有一个种蜂场进行优良品种的选择和杂交育种和保种工作。但随着1997年重庆直辖后， 又划了出去。因此，令人遗憾的是，现在四川这样一个大省，连一个较为正规的种蜂场 或育种中心都没有。没有专门的力量去研究蜜蜂的育种和保种，即使是当地的和引进的 优质蜜蜂品种的品质也会下降。在当今社会，蜂业发展有没有市场竞争力，说到底是一 个产品质量问题，而产品质量问题主要就是品种质量问题。有鉴于此，我们想利用人类 在分子遗传学、分子生物学等方面的最新科技成果，对我省最近引进的一些优良品系及 本省西蜂的DNA遗传多样性及其遗传分化情况。做一些基础性研究工作，以期为了解 各品系西蜂基因特征和各种品系的遗传资源及遗传多样性的保护．提供理论依据。 I．IRAPD技术应用于本研究的理论基础和优势 近年来，随着分子遗传学、数量遗传学、分子生物学等研究的不断深入和发展，以 DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的重要基础，随机扩增多态性 项以PCR为基础的DNA分子水平上的大分子多态性检渊技术．因为它有简便、快捷等 特点，使它迅速被用于基因组的多态分析，主要用于物种亲缘关系和系统分类的研究。 技术。他们进行这一理论研究工作的依据是：不同物种的基因组中与引物相匹配的核苷 酸序列的空间位置和数目都有可能不同，所以扩增产物的大小和数量也可能不同，这些 差异可以通过凝胶电泳显示出来。这种扩增产物的多态性本身可以用于分类研究和系统 l DNA的多态性充分展现。 RAPD技术表现出独到的特点和优势．第一，RAPD技术可以在对物种没有任何分 子生物学研究的情况下，对物种的基因组进行DNA片段多态性分析，并结合