螺旋藻源血管紧张素转化酶抑制肽的纯化和鉴定 - 生物化学与生物物理 .pdfVIP

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2010, 37(5): 568~574 旋藻源血管紧张素转化酶抑制肽的纯化和鉴定* 1,2) 1,2)** 1) 2) 鲁军 任迪峰 王建中 TANOKURA Masaru 1) ( 北京林业大学生物科学与技术学院，北京100083； 2) Dep artment of App lied Biological Chemis try, Graduate School of A gricultural and L ife Sc iences, Unive rsity of Tokyo, Tokyo 113-8657, Japan)) 摘要 血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂通过影响肾素- 血管紧张素系统，对减缓和抑制高血压具有重要的作用 该研究通过 超滤、凝胶过滤色谱、反相高效液相色谱等方法，从钝顶螺旋藻的木瓜蛋白酶水解液中分离、纯化得到一种血管紧张素转化 酶(ACE)抑制肽，并利用基质辅助激光解吸电离- 飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和氨基酸测序对纯化肽进行鉴定 此外， 对其抑制类型和体外模拟消化环境稳定性也进行了研究 结果表明，分子质量范围为0～3 000 ku 的酶解液ACE 抑制活性最 高， 值为(1.03 0.04)g/L 该部分酶解液通过纯化获得 ACE 抑制肽， 值为(0.009 4 0.000 2)g/L ，相当于(27.36 IC50 IC50 0.14)滋mol/L，序列经鉴定为Val-Glu-Pro Lineweaver-Burk 图和 Dixon 图表明该ACE 抑制肽为非竞争性抑制剂，Ki 值为 (23.59 0.54)滋mol/L 体外稳定性实验显示，该抑制肽在胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶等胃肠蛋白酶的消化下能够保 持良好的抑制活性，表明螺旋藻源ACE 抑制肽可以用于降血压功能食品和药剂方面，具有很好的发展前景 关键词 钝顶螺旋藻，血管紧张素转化酶，ACE 抑制肽，纯化，鉴定 学科分类号 Q5 ，Q55 DOI: 10.3724/SP.J.1206.2009.00647 [17] 血管紧张素转化酶(ACE, EC. )是肾素- (FAO)誉为21 世纪人类最理想的食品 螺旋藻中 血管紧张素系统中的关键酶，对高血压具有至关重 的蛋白质含量是大豆蛋白质的两倍，是 前已知植 [1] 要的调控作用 ACE 可以从没有生理活性的血管 物中蛋白质含量最高的一种，其中含有18 种氨基 [17] 紧张素 (Ang ) 的C 端切去2 个氨基酸残基 - 酸，包括人体必需的全部8 种氨基酸 ，是获得天 玉 玉 His-Leu, 使其转化为具有升压活性的血管紧张素域 然活性肽的潜在宝贵资源 本研究使用凝胶过滤色 (Ang ) ACE 还可将血管舒缓激肽降解为失活片