拖丝蛋白全基因亚克隆文库的构建和部分序列的测定.pdfVIP

第 32 卷第 2 期 南华大学学报·医学版 2004 年 4 月 ( ) Vol. 32 No. 2 Journal of Nanhua University Medical Edition Apr. 2004 　 拖丝蛋白全基因亚克隆文库的构建和部分序列的测定 1 1 2 2 张前军 ,祖旭宇 ,梁宋平 ,李 　敏 ( 1. 南华大学 生命科学学院 湖南 衡阳 421001 ;2. 湖南师范大学 生命科学学院) 摘　要 : 目的 　为获得蜘蛛拖丝蛋白全基因。方法 　以斑点杂交、Southern 印迹结果证实了的蜘 蛛拖丝蛋白全基因的克隆 ,构建其亚克隆文库 ,采用鸟枪法测序的策略 ,选取以 HinfI 为酶切工具 ,对 Scos - DS1 的DNA 做大量酶切 , 以pUC19 为载体 ,取插入片段大小为 500 bp 左右的阳性重组子 100 个构 建拖丝蛋白基因的亚克隆文库。结果 　成功地构建了蛛丝蛋白基因 Scos - DS1 由 Hinf I 酶切片段连接 而成的亚克隆文库 ,得到了其部分序列。结论 　亚克隆方法可以得到拖丝蛋白基因全序列。 关键词 : 亚克隆 ; 　拖丝蛋白 ; 　蜘蛛 ( ) 中图分类号:Q785 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :1672 - 7444 2004 02 - 0151 - 04 Construction of Subclone Library of Dragline and the Determination of Its Partial Sequence ZHANG Qian - jun , ZU Xu - yu ,LIANG Song - ping ,et al ( ) Life Science Institute of Nanhua University , Hengyang , Hunan 421001 , China Abstract : Objective 　To obtain the whole length gene of dragline. Methods 　The Scos - DS1 DNA was di gested with Hinf I and the subclone library of dragline was constructed using pUC19 as the vecter . After screening the library , 100 clones with insert around 500 bp in size were taken to determine the sequence. Results 　The sub clone library of dragline gene connected by enzymolytic fragment of HinfI was succesfully constructed and its partial sequences were gained. Conclusion 　The whole length gene of dragline can be gained by using subclone method. Key words : subclone ;