马鞭草C部位单体4′-甲醚-黄芩素对人绒毛膜癌细胞增殖的抑制作用.pdfVIP

中国肿瘤生物治疗杂志 http：／／www．biother．org · 444 · ChinJCancerBiother．Oct 2008，Vo1．15，No．5 DOI：10．3872／j．issn．1007-385X·2008·05·009 ·论 著 · 马鞭草 C部位单体4-甲醚一黄芩素对人绒毛膜癌细胞增殖的抑制作用 冯 播 ，徐昌芬 (南京医科大学 江苏省生殖医学重点实验室，南京210029) [摘 要] 目的：探讨马鞭草有效成分所提取 的单体4-甲醚一黄芩素(4-methylether—scutellarein，4-Ms)对人绒毛膜癌 JAR 细胞的增殖抑制作用及其相关机制。方法 ：JAR细胞传代后加入不同浓度4一Ms作用一定时问，应用 MTT法检测对细胞增 殖的抑制作用，流式细胞术测定细胞凋亡率及细胞周期变化，AO／EB双染法区分早、晚期凋亡细胞和坏死细胞，RTPCR技术 分析4一Ms对人绒毛膜癌JAR细胞凋亡相关基因Caspase3、p38MAPK及Survivin表达的影响，并进一步用 Westernblotting测 定Caspase3、p38MAPK及Survivin在用药前后蛋 白水平的表达差异。结果 ：不同质量浓度 (10、20、40mg／L)的4一MS对 JAR 细胞均有增殖抑制作用 ，并随药物浓度和作用时间的增加而不断增强 (P0．05，P0．叭)；流式细胞术显示，随着药物浓度 的增加细胞凋亡率亦逐渐升高，G：／M期细胞所 占比例增大 (P0．05)；AO／EB双染后发现，随着4Ms剂量的增加，晚期凋 亡细胞逐渐增多；20和40mg／L的4一Ms作用48h后，JAR细胞中p38MAPK及Caspase3mRNA表达下降，SurvivinmRNA表 达上升，与对照组相比均有统计学意义(P0．05)；Westernblotting证实，20mg／L和40mg／L4-MS作用48h后 Survivin蛋白 表达量显著下降，p38磷酸化水平升高，Caspase3被明显激活。结论 ：4-Ms能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖并诱导凋亡 ， 可能与其阻滞细胞生长于G／M期、抑制Sur~ivin抗凋亡活性，直接激活p38MAPK信号通路和Caspase3活化有关。 [关键词] 4-甲醚一黄芩素(4-MS)；人绒毛膜癌JAR细胞；Caspase3；Survivin；p38MAPK信号通路 [中图分类号] R737．33；R730．5 [文献标志码] A [文章编号] 1007—385X(2008)05-0444-07 Inhibitoryeffectof4-methylether-scutellareinonhumanchoriocarcinomaJAR cellsandthepossiblemechanism FENGBo，XUChang—fen (KeyLaborato~ofReproductiveMedicineofJiangsuProvince，NanjingMedicalUniversity， Naming210029，China) [Abstract] Objective：Toinvestigatetheinhibito~effectof4-methylether—scutellarein(4-MS)，anextractrfont Verbenaofficinalis，onhumanchoriocarcinomaJARcelllineandthepossiblemechanism．Methods：JARcellswere exposedto4-methylether—scutellareinofdifferentconcentrationsfor48h．MTTassaywasusedtoexaminetheanti—prolif- erativeeffectof4-methylether—scutellarein．Flow cytometrywasusedtoinvestigatetheapoptosisandthechangesofcell cycle．AO／EBdoublestainingwasappliedtodiscriminatetheapoptoticcel