牛和猪精液冷冻保存.pdfVIP

HeilongjiangJournalofAnimalReproduction Vo1．16No．6 2008 牛和猪精液冷冻保存 刘瑞鑫，吴柱月，黄光云，李 铭 (广西壮族 自治区畜牧研究所，广西 南宁 530001) 摘 要：简要回顾了家畜精液冷冻保存技术研究情况，并分析了影响冷冻精液质量的因素，初步指出了 目前仍然存在的问题及今后应该努力的方向。 关键词：牛；猪；精液；冷冻保存 中图分类号：$814．3 文献标识码：A 文章编号：1005—2739(2008)06—0029—03 近年来，我区畜牧工作者利用人工授精技术在全 油的稀释液稀释精子时应缓慢加入，或在第 1液中加 区各地大力推进家畜品种改良工作，而这一工作所使 入甘油总量的15％～30％，参与0 5℃的平衡 ，而后 用的精液绝大部分为冷冻精液。精液冷冻保存的好坏， 在冷冻前将剩余甘油含量的70％～85~JJn人第 Ⅱ液参 直接影响到人工授精的成果，进而影响到家畜品种改 与精液的冷冻，最后置于一196oC液氮中保存。但甘油 良的步伐。对于家畜精液冷冻保存的研究试验，常见有 在常温下对精子有毒害作用，其必须在较低温度下加 报道 ，且方法在不断改进，成果也比较明显，本文就此 入，这又给操作带来了一定的难度。为此，其他学者尝 简要综述如下： 试 了其 它物质 的研 究 ，Saweta (1973)、Shanno等 1 精液冷冻保存的原理 (1983)、Gupta等(1984)分别于冻前或解冻往牛稀释精 家畜精液冷冻保存，其原理是通过降低或抑制精 液中添加谷光甘肽 (GSH)，结果使精力和受胎率有明 子的新陈代谢强度从而达到延长精子体外寿命的 目 显提高。我国张文举等3]【也进行了类似的研究，并得到 的。精子在冷冻和解冻过程中可能受到伤害的原因是 类似的结果，其情期受胎率高达 69．95％，显著高于对 细胞内大冰晶的形成或细胞内溶质浓度的增加和伴随 照组 (63．71％)。王锋等4[J尝试用乙二醇、丙二醇代替甘 发生的冷冻过程中细胞脱水引起的变化 (溶液效应)。 油，结果表明：在 I液中添加2％乙二醇或2％丙二醇， 冷冻介质(稀释液)中加入甘油、二甲基亚砜(DMSO)等 其冷冻效果不亚于甘油，乙二醇、丙二醇等同样对冻精 抗冷冻剂可导致溶液在较低的温度下冻结 ，这可能阻 有保护作用，并且能提高精子的顶体完整率，更重要的 滞了细胞脱水和由此造成的溶液效应的有害影响，即 是乙二醇、丙二醇等毒性小，可能对胚胎成活有利。王 是说甘油、二甲基亚砜(DMsO)等对精子的存活具有保 锋等圈还做了脱脂初乳与常乳在牛冷冻精液中的应用 护作用Ⅱ1。 研究，试验结果表明：当完全以脱脂初乳或常乳替代稀 2 精液冷冻保存的研究情况 释液中的柠檬酸钠液后，虽然试验组与对照组间冻后 2．1 牛精液冷冻保存的研究 精子活力差异不显著，但精子总存活时间与顶体完整 牛精液冷冻保存技术上世纪50年代最先由英国 率有显著提高(P0．05)，尤以脱脂初乳为最好。傅春 学者 Smith和Polge试验成功，进入80年代后，牛冷冻 泉等 161研究表明：奶牛颗粒冷冻精液以氟板冻结，含 精液保存技术得到了快速发展，特别是近十年来 ，已形 EDTA的Ⅱ解冻液(组成：柠檬酸钠0-3 葡萄糖 5．0g、 成了一套较完整的工艺流程，情期受胎率可达60％以 EDTA0．1g、双蒸水 100mL)30oC或50℃解冻，解冻后 上l【J。许多国家早已普及使用冷冻精液，欧美一些发达 7～15℃保存 ，输精效果最好；细管冷冻精液则以38℃ 国家还成立了精液供应公司，开展国际间精液贸易业 解冻后 0～5℃保存输精效果最好。沙开友等 的研究 务。我国在90年代后已全面进入由颗粒型冻精向细管 则证实在稀释液中适当添加血清(10％)有利于精子的 型冻精生产的转变。 能量和呼吸，从而提高精子的活力。M．Moussa等[证实：