BH5500原子吸收光谱仪微量元素检测SOP.docVIP

微量元素检测 1.检验目的：定量分析全血或血清中微量元素（铜、锌、钙、镁、铁）的浓度。 2.测定方法：火焰原子吸收法、 3.实验原理： 复合元素空心阴极灯发射出的一束特定波长的特征谱线，穿过火焰原子化器上方火焰中，样本原子化过程中产生的待测元素的自由基态原子，对特征谱线产生部分吸收，未被吸收的部分透射过去，应用光学检测系统测量特征谱线光强大小，根据朗伯—比耳定律，通过标准曲线方法检测样本中铜、锌、钙、镁、铁元素的含量。 4.标本要求： 4.⒈标本类型： 新鲜采集的末梢血或静脉血（静脉血用肝素抗凝剂，不能用EDTA、枸橼酸钠等抗凝剂） 4.2标本采集与处理： 4.2.1严格按照医疗卫生操作规程要求，用酒精棉球彻底清洁、消毒被检测者无名指肚，静候待干。轻轻捏紧被检测者手指使指肚部皮肤绷紧，以一次性采血针快速刺穿指肚外侧皮肤，使血液自然流出，尽量不要挤压或者从手指近端轻轻挤压，第一滴血用滤纸擦拭弃掉。 4.2.2用微量吸管准确吸取40μl血样，管尖外壁附着血液用滤纸拭去，将吸管伸入装有1.2ml稀释液的离心管内液面下3、4毫米，轻轻缓慢排出血液，吸取清澈稀释液至 40μl刻度左右再挤出，重复一两次此清洗操作。 ★注意事项：操作时微量吸管头部不要接触其它物体表面，操作者手指不要接触稀释剂离心管帽内面，以免造成血液样本污染。 4.2.3盖紧稀释剂离心管的翻盖，轻轻摇晃混均。 ★警告： a采血时挤压操作可能导致血液标本被组织液稀释，标本中红细胞浓度降低，而铁、锌元素主要存在于红细胞内，从而引起铁、锌元素测量结果假性偏低误差。 b样本采集过程中的加样量误差可以导致测量结果的误差。 4.3标本存储与稳定性：待测样本暂时不能检测时，可置于冰箱内冷藏保存，可以保存7天左右，检测前取出放置达到室温平衡。 4.4标本量：40μl末梢血或静脉血。 4.5不可接受样本：有污染的样本。 5.仪器和试剂 5.1 仪器：BH5500原子吸收光谱仪 5.2 试剂准备：:随机配置专用试剂，密封存储于室温时（0~30℃）使用有效期同试剂盒上标注时间一致。 6.溯源性 溯源品名称 级别 标准物质编号 铜、锌、钙、镁、铁、钾、钠溶液成分分析标准物质 国家二级标准物质 GBW(E)080915--080917 7.质控品与质量控制 质控品是博晖公司提供的国家二级标准物质GBW（E）080915-080917。存储与使用详见标物说明书。 8.检测流程： 【仪器预热】 打开计算机并启动专用软件。 打开BH5500仪器电源开关。 点击【联机】图标联机，屏幕上显示联机成功。 静态预热。点击【能量调整】，全自动调整使能量达到100-110之间，预热20分钟以上。如果元素灯出现老化现象则要适当延长预热时间。 打开空气压缩机，调节输出压力至0.3MPa。 打开乙炔气瓶开关，将副表压力调至0.1MPa。 点火预热。将点火枪枪头置于燃烧头上方，按下打火钮，然后打开仪器的乙炔安全开关至有火焰燃烧，继续预热10分钟。 【仪器工作状态调整】 调控能量调整,点击自动调整，重新调整能量达到100-110之间。 调节火焰高度。旋转空气流量调节阀将空气流量调节至8 L/min，旋转乙炔流量调节阀将乙炔流量调节至2L/min左右，再微调乙炔流量至火焰上沿与仪器上平面平齐，且无黄色焰心。 【标准曲线制作】 点击【标样测量】进入标准样本测量界面。 进样。将毛细吸样管插入厂家提供的应用标准溶液瓶中的液面以下，观察屏幕上的吸光度曲线平稳后，按空格键读数。 建立曲线。按标准溶液进样顺序依次读数，自动出现曲线图形，五种元素的相关系数均达到0.9990以上，且灵敏度达标（如下表）方为合格。 元素 Cu Zn Ca Mg Fe 一号标液吸光度（AA） 0.050 0.0400 0.060 0.060 0.023 如曲线相关系数不能达标，重做曲线，仍不能达标则需要更换标准溶液后重做曲线。如灵敏度不能达标，则疏通或更换雾化器后，重做标准曲线。 曲线完成后点击确定，自动进入样本队列管理，建立队列后点开始工作进入样本测量界面。 【标本检测】 被测样本要与室温相同才能测量，如从冰箱取出，需要在室温下放置半小时以上再进行测量。 打开样品离心管时应注意，手或手套的任何部位都不能接触离心管盖的内沿，防止污染样本。 进样。将毛细吸样管插入样品离心管液面以下，观察屏幕上的吸光度曲线平稳后，按空格键读数。五种元素吸光度结果同时出现在屏幕上。 【结果报告】 在队列管理中输入病人资料，病人资料可以在测量前输入也可以在测量后输入，病人资料的项目可以选择。 打印检测报告，进入数据库，可按设定条件查询出检测结果，并按选择方式打印，将结果输出。 测量结果参考值是公司参考文献资料和本公司在北京地区所做大量样本统计得出的，有一定代表性，但不