·论着· 微小rna136过表达对结直肠癌细胞中钙结合蛋白s100a6 .pdfVIP

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2017-09-02 发布于天津
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·论着· 微小rna136过表达对结直肠癌细胞中钙结合蛋白s100a6

第二军医大学学报年月第卷第期：／／２０１２９３３９ｈｔｔｗｗｗ．ａｓｍｍｕ．ｃｎ　　　ｐｊ ·９４０ · 　　，，，ＡｃａｄｅｍｉｃＪｏｕｒｎａｌｏｆＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔＳｅ．２０１２Ｖｏｌ．３３Ｎｏ．９ｙｙｐ：／ ·论著· ＤＯＩ１０．３７２４ＳＰ．Ｊ．１００８．２０１２．００９４０　微小ＲＮＡ１３６过表达对结直肠癌细胞中钙结合蛋白Ｓ１００Ａ６含量及细胞增殖和凋亡的影响  霍中华，胡君，储著凌，宋博，吕盛，尹鹏　　　　解放军医院普外科，南京４５４２１０００２［摘］目的构建携带微小（）的真核表达载体并将其转染人结直肠癌细胞，观察外源性表达ＲＮＡ１３６ｍｉｒ１３６ｍｉｒ１３６　　　　对人结直肠癌细胞中钙结合蛋白Ｓ１００Ａ６表达及细胞增殖活性的影响。方法提取人肾上皮ＨＥＫ２９３细胞基因组ＤＮＡ，　ＰＣＲ扩增包含ｍｉｒ１３６前体序列的ＤＮＡ片段并构建重组载体，采用阳离子脂质体法将重组载体转染人结直肠癌ＨＣＴ１１６细胞。转染后，采用实时定量法检测细胞内含量变化，以蛋白质印迹法检测细胞中蛋白的表达；转染４８ｈＰＣＲｍｉｒ１３６Ｓ１００Ａ６后和，采用试剂盒检测肿瘤细胞增殖活性；转染后，以双染法检测细胞凋亡情况。结果成功构建重组２４４８ｈＣＣＫ８４８ｈ　真核表达载体并转染细胞。转染后，重组载体转染组细胞内相对表达量高于未转染组ｍｉｒ１３６ＨＣＴ１１６４８ｈＨＣＴ１１６ｍｉｒ１３６（），而蛋白的相对表达量则低于未转染组（）。同时，重组载体转染组细胞增殖活性较未转Ｐ０．０１Ｓ１００Ａ６Ｐ０．０１ＨＣＴ１１６＜＜染对照组降低（