内质网应激对3t3-l1 脂肪细胞成纤维细胞生长 - 中国医药生物技术.pdfVIP

中国医药生物技术 2014 年 12 月第 9 卷第 6 期 Chin Med Biotechnol, December 2014, Vol. 9, No. 6 433 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2014.06.004 ·论著· 内质网应激对3T3-L1 脂肪细胞 成纤维细胞生长因子 21 mRNA 表达的 调节作用 万晓珊，刘彦隆，张翼，肖业臣，张海淼，许竹梅，肖健 【摘要】 表达[5, 9-10] 。临床报告显示，非酒精性脂肪肝、2 型 目的 在 mRNA 水平探讨内质网应激对 3T3-L1 脂肪细 糖尿病和肥胖等代谢疾病患者的血清 FGF21 水平 胞成纤维细胞生长因子 21 表达的影响。 显著高于正常人群[11-13] 。许多动物实验也得到了类 方法 利用经典鸡尾酒法诱导 3T3-L1 前脂肪细胞分化，再 似的结果，与野生型小鼠相比，高脂饮食诱导的肥 用毒胡萝卜内酯分别按照剂量梯度（0、6.25、12.5、25 、50 胖小鼠和遗传型肥胖小鼠的血清 FGF21 水平明显 和 100 nmol/L ）和时间梯度（0、1、3、6 和 12 h ）进行处 升高，且在肝脏和白色脂肪组织中，FGF21 mRNA 理，实时 PCR 检测内质网应激相关蛋白 C/EBP 同源蛋白 水平呈高表达[7, 14-16] 。这些研究结果表明在糖尿病 和葡萄糖调节蛋白 78 以及成纤维细胞生长因子 21 mRNA 和肥胖等病理状态下，FGF21 浓度“应激性”升高， 的表达水平。 提示这可能是一种反馈性调节，但具体调控机制尚 结果 毒胡萝卜内酯能诱导分化成熟的 3T3-L1 脂肪细胞 未阐明。 发生内质网应激，促进 C/EBP 同源蛋白、葡萄糖调节蛋白 内质网是真核细胞中一种重要的细胞器，是蛋 78 和成纤维细胞生长因子 21 mRNA 水平显著升高，且与 白质合成、修饰的场所，参与糖类和脂类代谢，并 毒胡萝卜内酯的剂量和处理时间呈正相关。当用 100 nmol/L 维持细胞内钙平衡。但当细胞受到缺氧、毒性药物、 毒胡萝卜内酯处理 6 h 后，成纤维细胞生长因子 21 mRNA 感染等刺激时，内质网内未折叠蛋白聚集，钙离子 水平显著增高，为对照组的 114.55 倍（P 0.05 ）。蛋白激 平衡失调，引起内质网应激，这是机体的一种代偿 酶 C 抑制剂钙磷酸蛋白 C 能阻断由毒胡萝卜内酯诱导的 性过程，对细胞有保护作用。大量研究报道，内质 内质网应激，并伴随成纤维细胞生长因子 21 mRNA 水平的 网应激与肥胖、胰岛素抵抗和糖尿病等代谢疾病密 下降。 切相关。现已证实，肥胖可以引起肝脏和脂肪组织 发生内质网应激[17-18]，同时内质网应激也是触发胰 结论 内质网应激能上调 3T3-L1 脂肪细胞成纤维细胞生 岛素抵抗和 2 型糖尿病的核心机制[19-21] 。 长因子 21 mRNA 表达，且可被蛋白激酶 C 抑制剂钙磷酸 然而，肥胖和糖尿病等代谢性疾病中 FGF21 蛋白 C 阻断。 的变化是否与内质网应激有关尚未见报道。本研究 【关键词】 内质网应激； 3T3-L1 细胞； 成纤维细胞 用毒胡萝卜内酯（thapsigargin ，TG ）对已分化的脂 生长因子 21 肪细胞进行干预，建立内质网应激细胞模型，通过 中国医药生物技