高效液相色谱法测定天麻钩藤颗粒中黄芩苷的含量.pdfVIP

高效液相色谱法测定天麻钩藤颗粒中黄芩苷的含量   摘要：天麻钩藤颗粒是由天麻、钩藤、黄芩、牛膝等多味中药加工精制而成的中药复方制剂， 具有平肝熄风，清热安神之功效，用于肝炎上亢所引起的头痛、眩晕、耳鸣、眼花、震颤、 失眠等症。中国药典（2010 版）对该药品做了详细的阐述，本文应用 RIGOL  L‐3000 高效液 相色谱系统，采用药典规定的方法测定了天麻钩藤颗粒中黄芩的含量。实验证明 L‐3000 高 效液相色谱系统全面满足药典方法及系统适应性的要求，分析结果准确可靠。    一、引言    RIGOL L‐3000 高效液相色谱仪是北京普源精仪科技有限责任公司自主研发生产的、完整 的高效液相色谱系统，各项性能指标优良，整机系统稳定，广泛适用于分析检测的各个领域， 在中草药分析检定领域具有良好的应用。本文参照中国药典（2010 版）中规定的方法，应 用 RIGOL L‐3000 高效液相色谱系统分析了天麻钩藤颗粒中黄芩的含量，得到了较为理想的实 验结果。    二、实验部分    2.1 仪器及试剂  高效液相色谱仪：RIGOL L-3000 高效液相色谱系统（配 L-3300 自动进样器）（北京普源精 仪科技有限责任公司）； 超纯水纯化系统：milli-Q（美国Millipore）； 天平：BT 124S （德国塞多利斯）； 粉碎机:天津泰斯特 FW80； 酸度计：PHSJ-4A(上海雷磁)； 移液枪： 10-100 µl，100-1,000 µl(eppendorf)； 黄芩苷对照品：中国药品生物制品检定所，含量 95.2% （110715‐200815 ）  天麻钩藤颗粒样品：市售某品牌；  其余试剂均为市售 HPLC 级或分析纯。    2.2 色谱条件  色谱柱: Rigol：Compass , C18, 5 µm，4.6 x 250mm id， 柱 温：40℃； 进样量:10μL； 流动相：乙睛-水-磷酸（20:80:0.1） 流速: 1.0ml/min 检测波长：280 nm 2.3 试样准备 2.3.1 对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品，以 70%乙醇为溶剂配制浓度为 50μg/mL 的溶液，备用。 2.3.2 样品溶液的制备 取样品的细粉约 0.4ｇ，精密称定 ，置 25ml 容量瓶 中 ，加入７０％乙醇 约２０ml，超 声 震荡 提取１５ｍｉｎ后 ，放冷 ，用 同 种溶 剂 稀 释至刻度 ，滤过 ，取续滤液备用 。 2.4 实验方法 在选定的色谱条件下，分别吸取对照品和供试品溶液各进样 １０ul，测定峰面积值 ，按外 标法计算含量。 三、结果及讨论 3.1 线性范围 以黄芩苷标准溶液所做的标准工作曲线如下： 图 1 黄芩苷标准曲线图 线性方程：Y=85.62X-156.4，其中相关因子为 0.9998，说明该标准工作曲线具有良好线性 范围，能够充分满足样品分析的要求。 3.2 样品测试 取天麻钩藤颗粒样品溶液，按上述色谱条件及实验方法进行高效液相色谱测定，以外标法准 确计算含量，得到如下结果： 图 2 天麻钩藤样品实测 HPLC 色谱图 表 1 天麻钩藤样品实测结果 样品批号 试样浓度（μg/mL） 黄芩含量（mg/袋） 090801 23 16.8 （药典规定不得少于 15.0） 四、结论 1. 黄芩苷 在 ２７８nｍ 和 ３１４nｍ 处 有 最 大 吸 收 ，中国药典（20