CD59-siRNA对裸鼠移植人卵巢癌细胞CD59沉默效应的探究.pdfVIP

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2017-07-24 发布于贵州
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CD59-siRNA对裸鼠移植人卵巢癌细胞CD59沉默效应的探究.pdf

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CD59-siRNA对裸鼠移植人卵巢癌细胞CD59沉默效应的探究

摘要 A2780细胞上CD59的表达并使其抗补体活性下降，增加了肿瘤细胞对补体攻击的敏感性，有利丁．机体对肿瘤细胞的清除。本研究采用本课题组设计的pSUPER-siCD59重组载体，通过稳定转染 A2780细胞，从体内实验进一步探索该重组载体对CD59的沉默效应及抑瘤作用。细胞，G418选择性培养基中筛选具有抗性的单细胞米源的细胞克隆，扩大培养：将前两组A2780细胞和未转染(C组)的A2780细胞分别接种子裸鼠皮下建立肿瘤模型，连续观察30天，记录肿瘤出现时间，游标膏尺测量肿瘤长轴和短轴，绘制肿瘤生长曲线，并通过移植瘤组织切片CD59mRNA原位杂交、RT-PCR、CD59蛋白免疫组化年HWesternBlot研究其抑瘤效应及对CD59的沉默效应。筛选，得到抗性细胞克隆：裸鼠移植瘤瘤生长曲线显示，与对照组相比，CD59干扰质粒转染组肿瘤生长明显受抑制(尸0．05)且生长缓慢，V组与C组的瘤体积和重鼙的差异无统计学意义(P Blot结果于细胞膜，也可见于细胞浆，T组中CD59表达明显低于其他组(P0．05)：Western 与免疫组化结果一致。结论：裸鼠体内实验表明，特异性沉默CD59基冈的siRNA表达载体可以明显抑制CD59的表达，增加了卵巢癌细胞对补体攻击的敏感性，从而抑制卵巢癌在体内的生长，进一步说明了CD59在肿瘤免疫逃逸中的作．}}；{。硕士研究生冯翠萍(免疫学) 指导教师高美华教授关键词：CD59；A2780；RNA干扰；裸鼠㈣Yiii●l Ⅲ7，删3Ⅲ3舢4 川8 m肿l of innudemiceonovariancancercell CD59 xenograft Study targeted siRNA by ABSTRACT vitrostudieshaddemonstratedthattherecombinantvector objectives：In couldinhibitCD59 on CD59’S A2780，decrease pSUPER-siCD59 expression protection enhancetumorcell to againstcomplement，and susceptibility andfacilitatetumorclearance．The wasto the cytolysis inhibition presentstudy investigate effectof onCD59andthe ofovariancancerinvivo． pSUPER-siCD59gene growth Methods：A2780cellsweretransfectedwith blank pSU