CD59配体肽基因真核表达体系的构建和对前列腺癌PC-3细胞活性的作用研究.pdfVIP

CD59配体肽基因真核表达体系的构建及对前列腺癌 PC-3细胞活性的作用研究 摘要 胞CD59分子表达及功能的影响，为进～步研究sp22分子与CD59分子的作用机制及 利用短肽封闭CD59分子表达，为肿瘤基因靶向治疗开辟新途径。 方法构建含特异性sp22基因的真核重组表达载体sp—pIRES，脂质体法转染人前 变化，Western Blot、ELISA竞争抑制试验检测转染细胞CD59蛋白的表达；制备抗 响，MTT法测定PC一3细胞增殖抑制率。 结果PCR、双酶切及DNA测序鉴定表明成功构建了sp—PIRES真核重组表达载体； RT—PCR试验证实sp22在spPC一3细胞中成功表达；WesternBlot、ELESA竞争抑制 试验表明：spPC一3细胞比正常PC一3细胞CD59蛋白表达量减少，二者比较其差别有 正常PC一3细胞相比较细胞增殖抑制率增高，差别有统计学意义(PO．05)。 子的表达及功能，降低CD59分子抗补体活性，为进一步研究利用SP22阻断CD59分 子在肿瘤细胞上的表达创造了有利条件，为肿瘤的免疫治疗研究奠定基础。 硕士研究生 李伟伟(免疫学) 指导教师 高美华教授 关键词：配体；CD59；真核表达；PC-3细胞；补体 Constructionof CD59 Ligand-peptideEukaryotic ExpressionSystem andTheEffecton toPC．3cells Activity Abstract To constructCD59 Objective Ligand—peptide(sp22)eukaryoticexpressionsystem，and the and investigate functionofCD59onPC．3 isaimto expression cells，whichfuther theinter-mechanism study of andCD59aswellas to sp22 restrain usingLigand．peptide CD59 onPC-3cells expressing surface． Methods ofCD59 was Ligand-peptideeukaryotic expressionsystem recombinantswere transfectedintoPC一3cells stabletransfected byliposome．The clones werescreened theadditionofG418：The levelofCD59mRNAwere by