α-硫辛酸对电点燃致痫大鼠海马的保护作用和其机制研究.pdf

目 录 中文摘要……………………………………………………………………”1 英文摘要…………”…·……………………………………………………”4 研究论文 Q．硫辛酸对电点燃致痫大鼠海马的保护作用及其机制研究 前言目lj吾 ……………………………………………………………………”8““…一“…“…““…“…””…””…“”一“…”…”“…”…”“…8 材料与方法………………………………………………………………一8 结果 ……………………………………………………………………18 附图 ……………………………………………………………………20 附表…………．．…一……………·……………………………………‘27 讨论”一…”………．．一…．．．．…一…．．．．…．．．．………………………．．‘29 结论 ……………………………………………………………………32 参考文献……………………………………………………·………“33 综述]3DNF的研究进展……………………………………………………’36 致谢 ”一………““…一…一一………一…”．．””．．………”．．………．．’49 个人简历 ……………………………………………………………………50 中文摘要 Q一硫辛酸对电点燃致痫大鼠海马的保护作用及其机制研究 摘 要 目的：癫痫是一种慢性的神经系统疾病，以周期性复发和自发性发 作为特点。在成人，颞叶癫痫是最常见也是最棘手的。除了癫痫发作的影 响，病人还会因海马的进一步损害而发生认知功能的障碍。实验动物模型 研究表明，短暂重复发生的癫痫会导致海马损伤进而导致一定程度的认知 功能损害。癫痫确切机制还不十分清楚，可能的机制有：兴奋性氨基酸毒 性学说、能量代谢失衡、钙超载、氧化应激、致炎因子损伤、细胞凋亡。 研究发现，细胞凋亡信号通路是癫痫后神经元损伤的重要机制。Bax是参 与诱导细胞凋亡的重要细胞因子。Bcl一2是抗凋亡蛋白，其生理功能是延 长细胞寿命，防止细胞老化，阻遏细胞凋亡。脑源性神经营养因子(brain derived neurophic 等人首次从猪脑中分离纯化出一种蛋白质，具有促进神经生长活性的重要 作用。BDNF作用于中枢神经系统和外周神经系统的某些特定神经元，有 助于支持现有神经元的存活和促进新的神经元和突触的生长和分化。研究 证实，癫痫发作能够形成神经细胞损伤及丢失，因此探寻新的神经保护剂 具有重要的现实意义。 硫辛酸是B类维生素物质，许多食物中存在比较丰富的硫辛酸，在人 体中，硫辛酸存在于身体的各个部分，硫辛酸具有极强的抗氧化能力并且 容易透过血脑屏障到达中枢神经系统，正因为如此其药理价值受到许多专 家和学者的广泛关注。硫辛酸能够对抗氧化应激引起的细胞凋亡。还可抑 制神经细胞老化过程中的细胞凋亡，提高细胞存活率。 本实验采用成年雄性Wistar大鼠，通过杏仁基底外侧核电点燃法建 立大鼠慢性癫痫模型，根据Racine分级评价癫痫发作的级别并记录癫痫 大鼠持续后放电时间；并给予Q一硫辛酸干预，观察干预前后大鼠癫痫发 作的严重程度及持续时间，观察各组大鼠的行为学，海马组织形态学，并 运用WesternBlot及免疫组织化学方法在大鼠海马组织细胞中观察指标 BDNF、Bcl-2和Bax的蛋白表达，以研究大鼠杏仁核电点燃癫痫模型中， Q一硫辛酸的脑保护及抗癫痫作用，并进行探究其可能存在的机制。 中文摘要 机分为：假手术组、正常对照组、癫痫组、正常硫辛酸组、电刺激硫辛酸 低剂量组、电刺激硫辛酸高剂量组，每组各6只大鼠。正常对照组：0．9％ 物注射，共15次。假手术组：电极植入杏仁核后，不给予电刺激。癫痫 组：植入电极后每天按120％发作阈值电刺激一次，电刺激15天。正常硫 辛酸组：不做任何处置的大鼠Q一硫辛酸按40mg／kg腹腔注射，共15次。 电刺激硫辛酸低剂量组：杏仁核植入电极后，Q一硫辛酸按20mg／kg腹腔 注射30min后按120％发作阈值刺激一次／日，共15次。电刺激硫辛酸高 标准观察每组动物行为学表现。实验结束后24小时，灌注取脑，每组取 6只大鼠，用HE染色观察大鼠海马神经元损伤的影响，用免疫组织化学 取6只大鼠，断头