大鼠骨髓内皮祖细胞分离与体外培养条件研究.pdfVIP

第3O卷 第2期 世界科技研究与发展 V0l_30 No．2 2008年4月 198—201页 WORLD SCI-TECH R＆D Apr．2008 PP．198—201 大鼠骨髓内皮祖细胞分离与体外培养条件研究 何小解 许自川 郑 洪 一 党西强 易著文 曾雪琪 (1．中南大学湘雅二医院／bJL肾脏病研究室，湖南省／bJL肾脏病临床中心，长沙410011； 2．中南大学湘雅二医院麻醉科，长沙41001 1) 摘 要：目的探讨大鼠骨髓单个核细胞的最佳分离方法，观察不同培养条件对内皮祖细胞的生长情况、抗原表达的影响。方法健 康sD大鼠水合氯醛麻醉后断尾放血，从其骨髓中分离单个核细胞，重悬于添加不同条件培养基中，分别在预涂或未涂FN的培养 瓶中进行培养，记录细胞贴壁情况、集落生成时间和数量及细胞特异性抗原的表达。结果VEGF诱导是内皮祖细胞生长分化的必 需条件，在2—10 ns／mL之间，浓度越高，其对骨髓单个核细胞诱导分化的能力越强；bFGF能够协同VEGF诱导分化的作用；纤连 蛋白能够明显促进骨髓单个核细胞贴壁。贴壁细胞均表达内皮祖细胞和内皮细胞的特异性标志，各组之间没有明显差异。结论 大鼠骨髓中单个核细胞可以诱导分化为内皮祖细胞，VEGF(10 nS／mL)、bFGF(4 ns／mL)和纤连蛋白组合更有利于内皮祖细胞的 增殖分化。 关键词：大鼠；骨髓；单个核细胞；内皮祖细胞；体外培养 中图分类号：R331 文献标识码：A The Separation，Culture of Bone Marrow-derived Endothelial Progenitor Cells from Rats HE Xiaojie XU Zichuan ZHE NG Hong DANG Xiqiang YI Zhuwen zENG Xueqi (1．Laboratory of Pediatric Nephrology，the Second Xiangya Hospital，Central South University，Changsha 41001 I； 2．Department of Am ~thesiology，the Second Xiangya Hospital，Central South University，Changsha 410011) Abstract：Objective To explore the optimal method to isolate the bone malTOW derived mononuclear cells from the rats and observe the influ． ence of different culture systems to the growth and the differentiation of the endothelial progenitor cells，Methotis The mononuclear cells ob． talned from the b6ne mailow of healthy SD rats，which were exsanguinated by cutting the tails after anesthetized by 10％ chloral hydrate，were cuhured in fibronectin pre coated or not dishes filled with different mediums supplemented witIl VEGF of different concentration gradient and／or bFGF．码en the adherence．the number and the time for clono