加味四妙丸有效部位群指纹图谱研究.pdfVIP

南京中医药大学学报2008年l1月第24卷第6期 - - - — — 408 --·—— JOURNALOFNANJINGTCM UNIVERSBTVo1．24 ．6Nov．2OO8 加味四妙丸有效部位群指纹图谱研究 崔小兵 ，尹莲 ，李伟 (南京中医药大学中医药研究院，江苏 南京 210029；南京中医药大学药学院，江苏 南京 210046) 摘要：目的 建立加味四妙丸有效部位群非挥发性部位的指纹图谱。方法 用HPLC法建立加味四妙丸有效部位群非 挥发性部位指纹图谱，进行方法学考察，并制订有效部位HPLC指纹图谱技术参数。结果 有效部位群HPLC色谱条件 精密度、稳定性、重现性 良好，共确定l1个共有峰。结论 该方法准确、可靠，为更好的控制加味四妙丸有效部位提供了 科学依据。 关键词 ：加味四妙丸；HPLC；指纹图谱 中图号：R284．1 文献标识码：A 文章编号：1000—5005(2008)06—0408—02 加味四妙丸由苍术、黄柏、牛膝、薏苡仁、土茯 较小，作为参照峰不具有普遍意义，通过对加味四 苓等组成，临床常用于痛风的治疗，加味四妙丸有 妙丸有效部位群样品进行色谱跟踪分离，并经过 效部位群是由挥发油、生物碱、黄酮、皂苷、有机 紫外、红外、核磁共振、质谱四大光谱鉴定，选中其 酸、水液6个部位组合而成，本研究用 HPLC．PDA 中5号峰丁香苷作为参照峰，其保留时间为20．5 法对有效部位群中非挥发性有效部位(生物碱、黄 min，归一化面积 占10％以上。 酮、皂苷、有机酸、水液)建立指纹图谱，制订共有 2．3 色谱条件及分析方法 峰技术参数，表征加味四妙丸有效部位群成分特 色谱柱：C18(150rain×4．6min，5pan)； 征。 流动相：A：甲醇溶液，B：3％磷酸水溶液； 1 材料 梯度洗脱：0min：10％A，90％B；45min：45％ Water2690，996光电二极管矩阵检测器，Mil— A，55％B，50min：10％A，90％B； lennium32软件。 检测波长：280nm；流速 ：1．0mL／min，进样量 甲醇：色谱纯；重蒸水；磷酸：分析纯。 l0 ，t=30℃，归一化法计算相对含量。 其中所用药材都符合 《中国药典))2005版要 2．4 方法学考察 求。 2．4．1 稳定性试验 2 方法与结果 取供试品溶液(第 1批)，分别于0，2，4，6，12 2．1 有效部位群样品制备 h检测记录色谱图，计算各指纹色谱峰的相对保 加味四妙丸有效部位群样品，按文献方法 J 留时间和相对峰面积，结果见表 1、表2。 有效部位群制备方法，50％甲醇定容，配制浓度为 结果表明，各峰相对保留时间稳定，占总峰面 1g／mL，用0．45肿 微孔滤膜滤过，作为供试品溶 积 10％以上的共有峰5、6、8、9号峰的峰面积比值 液备用。 的RSD均小于3％，表明供试液在 12h内稳定。 2．2 参照物的确定 2．4．2 精密度试验 对药材中已知对照品小檗碱、巴马亭、蜕皮甾 取同一供试品溶液(第 1批)，连续进样6次， 酮等与指纹图谱对照，发现已知峰在指纹图谱中 收稿 日期：2008—06—03；修稿 日期：2008—07—11 基金项 目：江苏省 自然科学基金(Bl2 3) 作者简介：崔小兵(1975一)，男，江苏如皋人 ，南京中医药大学