分次加硒法培养高富硒量螺旋藻及其对藻体光合色素和蛋白质含量影响的研究.pdf

维普资讯 F(JoDANDFERME IAIlU lNDU5lKl￡ 分次加硒法培养高富硒量螺旋藻及其对藻体 光合色素和蛋 白质含量影响的研究 陈填烽 崔小峰 杨 芳 郑文杰 白 燕 (暨南大学化学 系 ，广州 ，510632) 摘 要 在螺旋藻生长 的不 同阶段分次添加无机硒 (Na2SeO3)进行 富硒处理 。设置 l1个实验组 ，分别从第 1天 至第 10天分次加硒 ，观察不 同硒处理组中螺旋藻对无机硒 的富集转化及其光合色素、蛋 白质 的变化情况 。结果 表 明，在螺旋藻生长 的第 7、8、9三天分次加硒 (实验组 7)，可获得硒产率 1743．06 g 、有机硒 比率为86_85％ 的高富硒量螺旋藻，与对 照相 比，其硒含量增加 150倍 ，生物量也明显提高(1．34g ，对 照组为 1，18g )；该实 验组藻体 中的硒主要分布在水溶性蛋 白质中，占总硒含量的 60．51％，占有机硒含量 的69．67％；螺旋藻主要营 养物质藻蓝蛋 白(PC)、别藻蓝蛋 白(APC)、类 叶黄素 、8一胡萝 素含量也有不 同程度 的增加 ，表 明此 富硒方法是 螺旋 藻高值化处理 的有效途 径。 关键词 硒，螺旋 藻，光合色 素，蛋 白质 硒 (Selenium)是 唯一受基 因调控 的人体必需微 100RP一18，内径 5 m)。类 叶黄素 、玉米黄质购 自 量元素，硒的缺乏将导致多种疾病llJ。一般认为 ，植 Fluka公司 ；8一胡萝 卜素和叶绿素 a购 自Sigma公司 ； 物来源的含硒物质生物活性和生物利用度较 高，是 色谱纯 甲醇、乙腈 、二氯 甲烷购 自Tedea公司；亚硒酸 安全高效的补硒制剂。硒 的生物效应与其化学形态 钠 (NaSeO)为国产分析纯。 密切相关 ，但生物体 中硒含量极低一直是 限制硒形态 1。2 螺旋藻的培养和硒胁迫处理 分析的瓶颈之一。螺旋藻 (Spirulinaplatensis)是一 钝顶螺旋藻藻种 由暨南 大学水生生物研究所藻 种具有较高营养价值的生物资源，在食品和医药领域 种室提 供 ，本 室保种 。采用 Zarrouk培养 基 ，于 250 具有较高的开发价值。实验证实螺旋藻是富集和转 mL三角瓶中接种处于对数生长期的螺旋藻藻液 100 化硒的理想载体_2l3J。富硒螺旋藻的培养一般采用 mL(初始藻密度 0D =0．10)。置于恒温光照培养 在第 1天开始加硒的方法 ，以期在长时间硒胁迫中获 箱 中，光照强度 5000Lx，光暗时间对 比为每天 12h： 得高富硒量螺旋藻，但各实验所得螺旋藻硒含量一般 12h，温度 30℃，pH=8．5。实验使用仪器用高压灭 只能达到400l／g／g左右。本实验在螺旋藻不 同生长 菌锅灭菌。 阶段进行分次加硒处理，可大幅度提高培养基中总硒 各实验组的硒胁迫处理 ：按表 1添加NaSeO 储 浓度 ，从而获得富硒量高达 1301．17 g／g的螺旋藻， 备液 ，使培养基 中最终硒累加量均为 1000mg／L，所 为生物体中硒的形态分析提供物质基础 ；同时避免高 示浓度均 以Se4计量 。 硒对螺旋藻的抑制作用，既获得高富硒量螺旋藻又可 1．3 生物量测定 促进藻体 中藻胆蛋白、光合色素等几种主要营养物质 生物量 (藻体干质量)的测定 ：将培养液用 300目 含量 的提高 ，这是富硒螺旋藻高值化产品开发的重要 筛绢过滤 ，用二次水洗涤 ，70℃下烘干至恒重。 前提 。 1．4 有机硒和无机硒的分析测定 1 材料与