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生物实验技术参考资料 第一章基础篇 实验室常识 一、注意事项 1凡挥发性、有烟雾、有毒和有异味气体的实验，均应在通风柜内进行，用后试剂严密封口，尽量缩短操作时间、减少外泄，操作者最好带口罩，手套。 2凡使用有机溶剂，记住两点: 第一，许多有机溶剂易燃(乙醚、丙酮、乙醇、苯等)，遇明火或点燃的火柴时就会燃烧，所以在使用这类试剂时，一定要远离火源，或将火源熄灭后，方可大量倾倒。 第二，许多有机溶剂有毒，例如许多含氯有机溶剂累积于人体内对肝脏有损害，因此要最大限度减少与有机溶剂接触，对挥发性有机溶剂一定在通风柜内操作。 3凡见光易变质的试剂，用棕色瓶贮存，或用黑纸包裹，并每次少量配制。 4量瓶是量器，不要用量瓶作容器。 5称量试剂，应用硫酸纸，不可用滤纸。 6标签纸的大小应与容器相称，标签上要写明物质的名称、规格和浓度、配制日期及配制人，标签应贴在试剂瓶2/3处。 7取用试剂和标准溶液后，需立即将瓶塞严，放回原处。取出的试剂和标准溶液，如末用尽，切勿倒回瓶内，以免掺混。 8配制试剂时，对所配的每种试剂，从纯度、结构式、相对分子质量、特性等都应熟悉、做到有的放矢。用过器皿应及时用自来水浸泡，以便于清洗和减少对器皿的侵蚀。 9使用贵重仪器如分析天平、分光光度计、离心机、微量移液器(枪)，应十分重视，加倍爱护，使用前，应熟知使用方法。若有问题随时请示指导教员。使用时，要严格遵守操作规程，如遇试剂溅污仪器及时用洁净纱布擦拭。发生故障时，应立即关机，告知管理人员，不得擅自拆修。10．洗净器皿应倒置架上自然于燥，不能用抹布擦拭。 二、实验室安全 在实验室里，经常与毒性很强、有腐蚀性、易燃烧或是有爆炸性的化学药品直接接触，常常使用易碎的玻璃皿，以及水、电、高温电器设备等。因此，必须十分重视安全工作。 （一）危险化学试剂及防护 1了解电闸、水阀门、煤气总阀门所在处，离开实验室时，一定要将室内检查一遍，应将水电、煤气等关好，门窗锁好。 2使用电器设备(如烘箱、恒温水浴、离心机、电泳仪等)时，严防触电，绝不可用湿手或在眼晴旁视时开关电闸和电器开关。检查电器设备是否漏电时，应将手背轻轻触及仪器表面，凡是漏电的仪器，一律不能使用。 3使用高压锅消毒时，不得离人。易燃、易爆、腐蚀、有毒等试剂，决不能放高压锅内消毒，防发生爆炸，造成人身伤亡。 4使用可燃物，特别是易燃试剂(包括可自燃物质):有气体、液体、固体。如乙胺、氧、乙醚、乙醇、丙酮、二甲苯、三硫化二磷、镁粉等。易燃和可自燃试剂应存放在阴凉处，并远离电源、暖气等。一旦发生事故性燃烧： (1)应立即关闭室内所有的电源和电加热器、关闭火源，速将其他可燃物移开现场，保持镇静，不要慌张，容器内着火，可用湿布等盖灭。撤落液体的燃烧可用灭火队灭火器等扑灭。 (2)关门，开启小窗及窗户。 (3)用毛巾或抹布擦拭潵出的液体，并将液体拧到大的容器中，然后再倒入带塞的玻璃缸中 5易爆炸试剂:氢、乙炔、乙醚蒸气等与空气混合后极小火花甚至用电器的电火花即可引起爆炸，苦味酸、硝酸镀、过氨酸、硝化纤维等，单独可自行爆炸，有时是几种试剂混合后容易产生爆炸，如硝酸镀和酯类及其他有机物混合、KmnO4与甘油或某些有机物混合都有可能发生爆炸。在使用这些试剂时，要小心仔细，严格遵守操作规则，要防止气体泄漏，尽量减少液体蒸气挥发。 6凡使用腐蚀性试剂(浓酸、浓碱等)，必须极为小心地操作，防止溅出，对于挥发性酸(HCl等)应在通风柜内进行，同时应在盘内操作，一旦有洒出，立即用大量自来水冲洗，若溅在实验台或地面，必须及时用湿抹布或拖布反复擦洗干净，不得留痕迹。 7废液特别是强酸和强碱不能直接倒在水池中，应先稀释，然后倒入水池，再用大量自来水冲洗水池及下水道。 8毒物应按实验室的规定办理审批手续后方可领取，使用时严格操作，用后妥善处理。 有毒试剂:对胂类化合物、秋水仙碱、细菌或病毒产生的蛋白毒素等在使用时一定要注意个人防护，戴口罩或在通风橱中操作。实验后的废液一定集中在特定的容器内，使用高浓度的铬酸氧化或用lmol/LKOH，或用NaOH处理后再倒入下水道。蛋白毒素可加热或用70%乙醇稀释的酚或甲醛使其变性。 （二）、生物安全防护 实验中有时所使用的标本中可能带有细菌、病毒，一部分属于特殊危险的病原体，如肝炎病毒、衣原体、结核杆菌等，都可以造成对人体的危害和环境污染，特别是有增殖过程的实验，PCR扩增DNA以及基因工程操作中重组DNA都要严加防护，避免对个体的危害和对环境的污染。世界卫生组织(WHO)已针对生物防护制定了《实验室生物安全指针》，文件中对相关实验操作的环境、空间、设施、防护方法及紧急情况处理都做了详尽的介绍，实验者可参照相关章节指导自己的安全防护图为安全防护标志。 （三）、放射性核素的防护