血浆蛋白质检验.PPT

第九章 血浆蛋白质检验 第一节 概 述 第二节 血浆蛋白质 测定 本章小结 三、血清清蛋白测定（溴甲酚绿法） 【原理】溴甲酚绿（BCG）在pH4.2的环境中，在有非离子型表面活性剂（Brij-35）存在时，可与清蛋白结合形成蓝绿色复合物，颜色的深浅在一不定范围内与清蛋白含量成正比。 BCG与清蛋白结合的特异性较低，它不仅与Alb结合呈色，还可与其他蛋白质呈色，其中α1-球蛋白，TRF、Hp最明显，但反应速度不同，Alb可立即反应（快反应），其他蛋白质反应慢（慢反应）。 【试剂】 1. 10mmol/L BCG贮存液 BCG1.75g，溶于5ml 1 mol/L NaoH溶液中，加蒸馏水至250ml。 2. 0.5mol/L琥珀酸缓冲贮存液（pH 4.1）NaOH 10g，琥珀酸56g，溶解于800ml蒸馏水中，用1mol/L NaOH溶液调pH至4.10±0.05加蒸馏水至1L。 3. 叠氮钠贮存液 叠氮钠40g溶于1000ml蒸馏水中。 4. Brij-35溶液 Brij-35 29g，加蒸馏水80ml，置80ml左右水溶使其溶解，然后加水至100ml。 * * 掌握双缩脲法测定血清总蛋白、溴甲酚绿法测定血清清蛋白的原理、试剂组成和作用、操作步骤、注意事项以及方法评价。 熟悉急性时相反应蛋白的概念、测定及临床应用。 了解血浆蛋白质的组成、功能及分类。 一、血浆蛋白质的组成、功能及分类 （一）血浆蛋白质的组成 血浆蛋白质是血浆固体成份中含量最多、组成复杂、功能广泛的一类化合物。占血浆固体成份90％左右，目前已经研究的血浆蛋白质有500多种，分离出的纯品物200来种，除免疫球蛋白外，主要由肝细胞合成。 第一节 概 述 （二）血浆蛋白质的功能 1. 维持血浆胶体渗透压 清蛋白。 2. 作为某些物质的载体 如清蛋白能与多种物质结合（FA、胆红素），而某些球蛋白具特异地运输某些物质的功能，运铁蛋白、运皮质醇蛋白。 3. 维持体液pH恒定 血浆蛋白pI一般都小于7.4，是弱酸，一部分以弱酸盐形式存在，构成缓冲对。 4.免疫功能 血浆中许多具有免疫功能的球蛋白，主要由浆细胞合成，电泳时位于γ区带，如IgG、IgA、IgM、IgD、IgE，此外，还有具有免疫作用的非特异球蛋白，如补体。 5.凝血与纤溶作用 凝血与纤溶是一对矛盾的统一、凝血因子与纤溶因子绝大部分是血浆蛋白质，它们促进血液凝固，防止血液流失和溶解血栓，防止重要脏器的动脉栓塞。 6.营养作用 血浆蛋白质可分成AA，用于合成组织蛋白或氧化供能。 7.催化作用 血浆中有许多酶类，其中部分在血浆中发挥作用，称血浆功能性酶，如凝血酶原、纤溶酶原、铜蓝蛋白、LPL、LCAT、肾素等。 二、常见血浆蛋白质特性 （一）前白蛋白（PA）分子量5.4万，由肝细胞合成，电泳时移动速度较白蛋白快，位于其前方面得名，半寿期短12h，PA是一类运载蛋白，能与甲状腺素、VitA等物质结合，常用测定方法是免疫化学方法， 【参考范围】0.2～0.4g/L, 【临床意义】是反映肝脏损害的早期灵敏指标，急性炎症，恶性肿瘤，肝硬化或肾炎时下降。 （二）白蛋白（allumim, ALb）分子量6.6万，由肝实质细胞合成，半寿期15～19天，是血浆中含量最多的蛋白质，占40％～60％，主要功能，维持血浆胶体渗透压，缓冲作用，运输作用，营养作用，调节某些激素或药物活性。 白蛋白可微量地通过肾小球，约0.04％，但大部分被血小管重吸收。白蛋白的测定方法目前主要是溴甲酚绿（BCG）法。 【参考范围】35～55g/L 【临床意义】血浆白蛋白增高临床少见，主要见于严重失水引起血液浓缩。血浆白蛋白降低临床常见。①合成障碍，急、慢性肝炎。②丢失过多，肾病综合症、慢性肾小球肾炎、糖尿病、系统性斑狼疮等。③分解过多，营养不良，慢性胃肠道疾病。 （三）α1-抗胰蛋白酶（α1AT或AAT），分子量5.5万，pI4.8，含糖10％～12％，电泳时位于α1区带，占90％左右，由肝细胞合成，能抑制多种酶活性，尤其是蛋白酶，占血清中抑制蛋白酶活力的90％左右，抑制作用有明显的pH依赖性，在中性和弱碱性中活力最大。 AAT也是一种急性时相反应蛋白，主要功能是对抗多形核白细胞吞噬作用时释放的