JNK通路对周期性机械牵拉刺激人肺泡上皮A549细胞ICAM-1表达的影响.pdfVIP

Medic珂JounIal 广东医学2016年10月第37卷第19期G岫ngdong 0ct．2016，V01．37，No．19 ·2851· JNK通路对周期性机械牵拉刺激人肺泡上皮 木 A549细胞ICAM一1表达的影响 胡晓波1，张优仪2，程德云3△ 1四川省成都市第一人民医院呼吸科(610041)；2四川省人民医院放射科(成都610041)；3四川大学华西医院呼吸 科(成都610041) 【摘要】 目的探讨c—Jun氨端激酶(JNK)信号通路在周期性机械牵拉刺激人肺泡上皮A549细胞表达细 胞间黏附分子一l(IcAM—1)中的作用。方法建立离体A549细胞机械牵拉刺激模型：以大小为1000岬train的 牵拉力刺激细胞，机械牵拉刺激前(0min)和机械牵拉刺激后5、15、30、60min时间点进行观察。选用JNK特异性 阻断剂sP600125，实验分空白对照组(0min)，机械牵拉5、15、30、60min组，阻断剂预处理组，阻断剂预处理+机 械牵拉5、15、30、60rrIin组，共10组，每组3皿细胞。采用westemblot检测细胞内JNK、磷酸化JNK、IcAM一1蛋 白的表达变化。采用RT—PcR检测ICAM—l的mRNA表达变化。结果与空白对照组比较，A549细胞经单纯 机械牵拉刺激后，磷酸化JNK蛋白水平增加，以30min时间点最为明显(P0．05)；随着机械牵拉刺激时间的延 长，在60min时间点磷酸化JNK蛋白水平下降至约基线水平，与基线水平差异无统计学意义(P0．05)。单纯机 械力作用后，IcAM一1蛋白及其mRNA水平在60rnin时间点有较明显增加(p0．05)。阻断剂sP600125预处理 min 后再经机械刺激磷酸化JNK蛋白的表达水平升高不明显(PO．05)，同时IcAM一1蛋白及mRNA水平在60 时间点增加亦不明显(P0．05)。结论机械牵拉刺激通过激活A549细胞JNK蛋白信号通路，从而引起细胞 IcAM一1的表达变化，提示JNK信号通路有可能参与了”49细胞的机械力信号转导过程。 【关键词】机械牵拉；A549；JNK；信号转导 rIhee脏ctsofJNK on ICAM一1inmechaIlicalstm蛐一s缸lllatedh咖柚aIv∞- p劬waythe既pn嘟i帆of cycⅡc ceuA549．日U lar印妯印al X洳一60。，ZHA膳you一一，C嬲，vG De一弘几．。D印凸n胱m矿脚i删。可胁如i鹏， 舭n巧f Peop如’s舶印i以旷Ck，鹕．dua秒，Ck，增也61004l，吼i加． c0呻po捌昭口叭幻r：c珊1ⅣG忱一弦，1．E一，船以：ckng如弘n@so^u．cDm 7ro theroleofc—JunN—te珊inal the ofIcAM一 【Abs嘲】objec廿、reirlvestigate kinase(JNK)inexpression 1 in mechanicalstretch—inducedhuman cellA549．Metho‘lsMechanicalstretchmodelwas cyclic alVeolar印ithelial establishedinA549ceUs．neA549ceUswerestimulatedstretchatthe of for aIld by magllitude1000¨strain5，15，30 intoten for and inhibi- divided 60商n