谷氨酸转运体LAST在小鼠视网膜兴奋性损伤后的表达.pdfVIP

谷氨酸转运体BLAST在小鼠视网膜兴奋性损伤后的表达 摘要 目的：本实验在NMDA(N一甲基一D天门冬氨酸)所致小鼠视网膜兴奋性损 伤中，观察谷氨酸转运体GLAST的蛋白表达量和mRNA随时问表达量的变 化，探讨BLAST对神经节细胞凋亡的作用。 半，体重约20—309，随机分成A、B、C三组，A组6只为J下常对照组，B、 C为实验组各24只，其中B组为NMDA兴奋性损伤组，C组为空白对照组。 B组、C组于造模后6h、24h、3d和7d四个时间点处死。处死前对每组 小鼠进行暗适应，至少暗适应6小时，然后进行视网膜电生理(ERG)检 查。ERG操作完毕处死动物，取每只小鼠左眼眼球做病理切片，进行HE 染色、免疫组织化学及TUNEL凋亡细胞染色，右眼眼球取完整视网膜用 问表达变化，以及与正常组比较表达差异。 较未见明显差异，造模后24h，视网膜的神经节细胞层开始出现凋亡形 态细胞，3d凋亡细胞增多并且神经节细胞数目逐渐减少，7d兴奋性损伤 组神经节细胞的数目更少，而且内丛状层变薄，与正常组比较差异有统 间点均未见明显异常，差异无统计学意义(P0．05)。 正常对照组比较，在标准混合反应中b波波幅显著下降，差异显著有统 异(P0．05)。 到红染的凋亡细胞，24h组凋亡细胞数量最多，与正常组比较差异有统 常组比无统计学意义(P0．05)。 4、免疫组织化学：三组中都能见到GLAST蛋白的表达，正常组与PBS 组可见GALST蛋白分布在视网膜全层，且主要分布在内外丛状层。NMDA 白在内丛状层、神经节细胞层的浓度要明显高于其他各层。 组比较未见明显差别。 结论： 1、玻璃体腔注射NMDA制作动物视网膜兴奋性损伤模型简便易操 作、可重复性强，无论从形态学还是功能上都证明其可以用做理想的 青光眼动物模型。 ． ， 2、GLAST蛋白、mRNA表达下调，而神经节细胞存活率也下降，这 说明GALST表达减少可能加重了神经节细胞的损伤。 3、GLAST蛋白表达发生了位置的重新分布，可能是一种自我保护 的代偿机制。 关键词：谷氨酸；谷氨酸转运体：GLAST；视神经保护；神经 节细胞 The oftheGlutamate GLASTinthe expression transporter mouses’retinaafterexcitiotoxic injury Abstract ectiveThe ofthis isconductto whether Obj purpose experiment study glutamate GLAST occurwiththemodleofretinaexcitotoxicinthe transporterchanges injury mouse． MethodRetinaexcitotoxicwasinducedinone of54adultC57BJ／6L injury eyes mouses intravitreal．Therewere3 byinjectNMDA(N—methyl—Daspartate)to normal control the eyes)、the eyes)andexperimental groups，thegroup(6 group(24 the