茶树菇多糖的提取工艺及对活性氧自由基清除作用研究.pdfVIP

· 食 用 菌 · 北方 园艺2008(11)：184～186 茶树菇多糖的提取工艺及对活性氧自由基清除作用研究 詹 忠 根 (浙江经贸职业技术学院，浙江 杭州 310018) 摘 要：采用热水法浸提茶树菇多糖，筛选、优化多糖提取、醇析的最佳条件及脱蛋白工艺， 并测定了茶树菇多糖对 自由基的清除能力。结果表明：在pH值为9．0条件下以1：2O的料液比 加入茶树菇粉末，置90℃的热水中浸提4h后以80u／rnL的胰蛋白酶进行脱蛋白处理，然后将多 糖提取液浓缩 5倍后添加浓缩液重4．5倍、浓度为95 的乙醇进行醇析，多糖的得率最高。茶树 菇多糖对氧 自由基和羟 自由基均有较强的抑制和清除能力，且随着样品浓度的增高而加强，呈现 出较好 的剂量一效应关系。 关键词：茶树菇多糖；提取条件；活性氧自由基 中图分类号：S646．19；Q539 文献标识码：A 文章编号：1001--0009(2008)11一O184一O3 茶树菇 (Agrocybeaegerita)是一种集营养、保健、理 验 (表 1)。取适量茶树菇干燥粉末于 1000rnL圆底烧 疗于一身的纯天然食用菌。其药用成分主要是多糖，具 瓶中，按一定的浸提温度、时间、料液比、浸提 pH值进行 有抑制癌细胞生长和降血糖作用。现以反应条件温和、 提取，浸提液用旋转蒸发仪浓缩后将溶解液置于分液漏 能较好地保持多糖的天然结构与活性的热水浸提法提 斗中加入8OU／n1L的胰蛋白酶进行去蛋白处理，然后 取茶树菇多糖，筛选、优化多糖提取、醇析的最佳条件及 加人浓缩液 4．5倍量、浓度为 95％的乙醇使多糖沉淀， 脱蛋白工艺，并测定了茶树菇多糖对氧自由基的抑制能 测定多糖含量。 力和对羟自由基的清除能力，以期有助于深入、系统地 表 1 多糖最佳浸提条件筛选因子和水平 开展茶树菇多糖的结构、理化性质、药理作用和临床应 用等研究，为进一步开发茶树菇多糖功能食品、保健品 和多糖类药物打下 良好的基础。 1 材料与方法 1．1 试验材料 1。4 茶树菇多糖脱蛋白工艺研究 茶树菇干 品(尚鲜茶树菇，上海好雄食 品有限公 配制 5O／mL的胰蛋白酶液，在 6只锥形瓶中各吸 司)，将茶树菇在 55。C烘箱干燥 3h，用粉碎机将干燥后 取茶树菇多糖浓缩液 10mL(pH8)，将酶液及多糖浓缩 的茶树菇粉碎后可过8O目筛，得到茶树菇细粉末。 液同时放入 37。C水浴锅中预热 10min，然后分别吸取酶 1．2 含量测定方法 液4、8、16、20．4、24、26．6mL依次加人样品瓶中，振荡保 多糖含量的测定方法为苯酚一硫酸法，标准曲线： 持30min后放入 i00℃水浴锅中灭酶 10mJn，冷却至室 —O．246z—O．342，相关系数 一0．9956。多糖损失 温。弃去上清液将沉淀物烘干、称重，加水 5mL溶解 率=(M1一M2)／M1(M1：脱蛋 白质前原液中多糖 的含 (pH8)，进行测定。 量，M2：脱蛋白后原液中多糖的含量)。蛋白质含量测定 1．5 茶树菇多糖醇析条件筛选 采用考马斯亮蓝 G一25O法，蛋 白质的脱除率一(N1一 采用 (3)正交设计试验对茶树菇多糖的最佳醇 N2)／NI(N1：脱蛋白质前原液中蛋白质的含量，N2：脱蛋 析条件进行筛选 ，以茶树菇多糖含量为考察指标进行试 白质后原液中蛋白质的含量)。 验(表2)。在除去蛋白质的茶树菇多糖浓缩液中加入一 1．3 茶树菇多糖提取条件筛选 定量的不同浓度的乙醇，室温下静置 24h，使多糖充分 采用 乙)(3)正交设计试验对茶树菇多糖的最佳浸