苹果属皱叶型植株实生后代倍性鉴定研究.pdfVIP

北方 园艺2oo8(11)：43～46 ·试验研究 · 苹果属皱叶型植株实生后代倍性鉴定研究 王 颖，周 攀，王 玉 霞，魏 鑫，董 文 轩 (沈阳农业大学 园艺学院。辽宁沈阳11O161) 摘 要：利用染色体计数方法和流式细胞仪对皱叶型植株的13株实生后代进行 了倍性鉴 定。结果表明：实生后代苗中出现皱叶和光叶2种类型，2种鉴定方法获得的结果一致。实生后 代中出现二倍体、三倍体和四倍体。其中8株光叶型全部为三倍体，5株皱叶类型中1株二倍体， 3株三倍体和 1株四倍体。这为丰富苹果无融合生殖砧木的育种理论，获得新的无融合生殖砧木 提供有益的借鉴。 关键词：皱叶株系；倍性鉴定；实生后代；平邑甜茶；苹果属 中图分类号：S661．04 ．3 文献标识码 ：A 文章编号 ：1001--0009(2008)l1一O043一O4 苹果属(MalusMil1．)属于蔷薇科 (Rosaceae)苹果亚 平邑甜茶(母)与扎矮山定子 (父)杂交后代皱叶型株 科 (Maloideae)，全世界约有 38种。我国苹果属植物的 系 10 (四倍体)的自然实生后代 1a生皱叶和光叶实生 种质资源十分丰富，丰富的资源对培育新品种或砧木将 苗；生长于沈阳农业大学园艺学院苹果育种基地，正常的 起着重大的作用[1]。束怀瑞[2认为充分发掘和利用丰 田间管理。 富的砧木资源，选育适应不同生态条件下的各类苹果砧 1．2 植株倍性鉴定 木已成为果树育种的一项重要内容。 1．2．1细胞学鉴定 上午 10时左右从再生植株上剪取 平邑甜茶 (Malushupehensis(Pamp．)Rehd．var． 1ctn长的顶梢，用饱合对二氯苯水溶液在18-C下处理6～ pingyiensisJiang)为湖北海棠的一个变种，原产于我国山 7h，在卡诺溶液固定2～24h后用7O 的乙醇保存。将样 东省平邑县，具有非常高的无融合生殖能力 ，其无融合 品放在5mol／L盐酸溶液中解离2min，用蒸馏水洗净，取 生殖率在 95 以上，树性乔化，耐荫、抗涝能力强，嫁接 1NIITI左右茎尖分生组织进行压片和染色，每个材料检测 苹果的亲和力强，是 目前苹果生产中已被广泛应用的乔 分散好的分裂细胞 3O个。 化砧木[1]。扎矮山定子(Zha~iShandingzi(Malus．Bac— 1．2．2 流式细胞倍性分析 参照吴雅琴跚报道的测定方 cata(L)Borkh．)发现于内蒙古自治区呼伦贝尔盟扎兰 法，以二倍体山定子为对照；采用美国Beckman公司的流 屯，是普通山定子的矮生型突变；它与普通山定子或苹果 式细胞仪测定DNA含量。试验在河北省昌黎果树研究 品种杂交后代中的高株与矮株比例为 1：l，并可以保持 所进行。称取100nag幼叶，在滴有2mL提取缓冲液的培 高抗寒性[3]。董文轩等[]以平邑甜茶为母本与扎矮山定 养皿中研碎，500目尼龙网过滤，滤液用标准试管收集，再 子杂交，共获得100多株有性杂交后代，以期得到既具有 加入2mL染色缓冲液，暗处常温下染色3Omin，随即上机 矮化抗寒特性，又具有无融合生殖特性的苹果砧木资源。 测定。 在以前工作基础上 ，以平邑甜茶与扎矮山定子杂交 2 结果与分析 后代中分离出来的皱叶型植株单系为试验材料，对皱叶型 2．1 细胞学鉴定 株系自然授粉后代实生苗进行了倍性鉴定，以期加深对苹 1O皱叶型株系的自然授粉实生后代苗中出现皱叶 果属植物进化及亲缘关系的认识，为苹果砧木育种特别是 和光叶2种类型，进行茎尖染色体数 目鉴定，结果表明： 无融合生殖型砧木育种提供新的依据。 对照植株山定子茎尖染色体数 目是 2n=